玉米是我國重要的糧食作物和飼料來源，低溫會影響玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)。研究者將從微生物中獲得的CSP（冷激蛋白）基因與玉米基因的ubi啟動子相連后構(gòu)建基因表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入玉米細(xì)胞中，獲得了具有低溫耐受性的玉米植株，如圖1所示。請回答：
（1）研究者提取玉米的DNA，可利用PCRPCR技術(shù)將ubi啟動子擴(kuò)增出來。圖1所示過程①需限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶的催化，獲得的ubi-CSP基因在構(gòu)建基因表達(dá)載體時須插入到T-DNA片段中的原因是只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上。
（2）過程②需要用CaCl2溶液CaCl2溶液處理農(nóng)桿菌以利于重組DNA的導(dǎo)入。影響過程③的因素主要有農(nóng)桿菌的種類、外植體的類型及狀態(tài)、共培養(yǎng)的時間等農(nóng)桿菌的種類、外植體的類型及狀態(tài)、共培養(yǎng)的時間等，一般來說只有處于細(xì)胞周期S期S期（時期）的細(xì)胞才具有被轉(zhuǎn)化的能力。為了減小農(nóng)桿菌對愈傷組織再分化的影響，需要在培養(yǎng)基中添加抗生素抗生素。
（3）研究者分別提取了野生型玉米及5株轉(zhuǎn)基因玉米的染色體DNA，用限制性核酸內(nèi)切酶處理后進(jìn)行電泳。電泳后的DNA與基因探針進(jìn)行雜交，得到圖2所示放射性檢測結(jié)果，該結(jié)果表明第1、2、4、51、2、4、5株CSP基因已整合到玉米染色體基因組。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；限制酶和DNA連接酶；只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上；CaCl2溶液；農(nóng)桿菌的種類、外植體的類型及狀態(tài)、共培養(yǎng)的時間等；S期；抗生素；1、2、4、5
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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