某興趣小組在寒假以“血紅蛋白的提取和分離”為課題,進行了科學實踐活動。分析并回答下列問題:
(1)該小組準備提取血紅蛋白的實驗材料,你的建議是 豬血豬血(填“豬血”或“蛙的紅細胞”)。理由是 哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器,減少干擾哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器,減少干擾。
(2)為了防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入 抗凝血劑抗凝血劑。樣品處理中紅細胞要用 生理鹽水生理鹽水洗滌,并采用低速短時間離心,如此反復(fù)三次,直至 上清液不再呈現(xiàn)黃色上清液不再呈現(xiàn)黃色,表明紅細胞已經(jīng)洗滌干凈。
(3)將洗滌干凈的紅細胞置于燒杯中,加入蒸餾水和 甲苯甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析,透析的目的是除去相對分子質(zhì)量 小小(填“大”或“小”)的蛋白質(zhì)。
(4)該小組通過粗分離獲得血紅蛋白混合液后,可以用凝膠色譜法進一步純化。使用該方法時,先從色譜柱中洗脫出來的是相對分子質(zhì)量 大大(填“大”或“小”)的蛋白質(zhì)。操作時要注意色譜柱的裝填不得有氣泡,原因是 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)會進入凝膠顆粒內(nèi)部,而使其所經(jīng)過的路程較長;相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)被排阻在凝膠顆粒外面,在顆粒之間迅速通過相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)會進入凝膠顆粒內(nèi)部,而使其所經(jīng)過的路程較長;相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)被排阻在凝膠顆粒外面,在顆粒之間迅速通過。
(5)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于 分子大小分子大小。
【答案】豬血;哺乳動物成熟紅細胞中沒有細胞核和各種細胞器,減少干擾;抗凝血劑;生理鹽水;上清液不再呈現(xiàn)黃色;甲苯;??;大;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)會進入凝膠顆粒內(nèi)部,而使其所經(jīng)過的路程較長;相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)被排阻在凝膠顆粒外面,在顆粒之間迅速通過;分子大小
【解答】
【點評】
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