家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力科學(xué)家將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。請回答下列相關(guān)問題:
(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細(xì)胞。在培養(yǎng)動物細(xì)胞時,培養(yǎng)液中需要通入CO2,作用是維持pH值的穩(wěn)定維持pH值的穩(wěn)定。
(2)采用PCR技術(shù)可擴(kuò)增干擾素基因。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、Taq酶(耐高溫DNA聚合酶)Taq酶(耐高溫DNA聚合酶)和引物引物。
(3)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的啟動子啟動子和終止子終止子之間。
(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時,貼滿瓶壁的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制接觸抑制現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積細(xì)胞貼壁生長的附著面積,從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于氣體交換。
【考點(diǎn)】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程.
【答案】胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);維持pH值的穩(wěn)定;Taq酶(耐高溫DNA聚合酶);引物;啟動子;終止子;接觸抑制;細(xì)胞貼壁生長的附著面積
【解答】
【點(diǎn)評】
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