低溫冷害是限制水稻產量和品質的重要因素之一。揭示水稻耐冷機制對于我國糧食安全具有重要意義。
（1）低溫會

降低

降低

細胞膜流動性，引起膜上Ca²⁺離子通道開放，Ca²⁺以

協(xié)助擴散

協(xié)助擴散

方式大量進入細胞，使植物感知低溫信號并作出應答，但是長時間低溫脅迫可引起細胞內活性氧積累，過量活性氧會造成

蛋白質、核酸

蛋白質、核酸

等生物大分子損傷，誘導細胞死亡。
（2）W63蛋白是一種轉錄因子，參與水稻低溫脅迫應答。研究者構建水稻W63基因敲除突變體，將幼苗放入低溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，植株存活情況如圖1，葉片活性氧含量測定結果如圖2。

W76蛋白是調控活性氧清除基因表達的一種轉錄因子，其表達量在冷處理后的W63基因敲除突變體中顯著升高。結合圖1、圖2，闡述W63和W76在水稻低溫脅迫應答過程中的作用機制。

敲除W63基因，W63蛋白減少→對W76表達的抑制作用解除，W76表達增加→促進活性氧清除基因表達→有效緩解因低溫脅迫導致的活性氧含量積累→細胞死亡率降低，植株存活率升高

敲除W63基因，W63蛋白減少→對W76表達的抑制作用解除，W76表達增加→促進活性氧清除基因表達→有效緩解因低溫脅迫導致的活性氧含量積累→細胞死亡率降低，植株存活率升高

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（3）W76通常具有轉錄抑制作用，b148蛋白具有轉錄激活作用，二者可形成蛋白復合體。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，與bl48的結合使W76具有了轉錄激活活性，且二者形成的蛋白復合體增強了彼此的轉錄激活活性。
GD基因編碼的GD蛋白與特定DNA結合域（序列）結合，與GD蛋白結合的轉錄因子就可以足夠靠近啟動子進而調控下游基因表達。研究者構建多種表達載體，導入水稻原生質體中，檢測熒光素酶活性。選擇選項的序號填入表格，將驗證b148與W76相互作用的實驗方案補充完整并預期丙組的實驗結果。

圖中丙與戊實驗結果相近

圖中丙與戊實驗結果相近

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組別	表達載體類型	實驗結果
甲	①、②
乙	①⑤ ①⑤
丙	①④⑤ ①④⑤
丁	①⑥ ①⑥
戊	①、③、⑥

（4）水稻在我國廣泛種植，但每年因低溫冷害導致我國水稻減產300～500萬噸。基于上述研究，請為培育耐冷型優(yōu)質水稻提供一個研究方向。

敲除W63基因；過度表達W76基因（或b148基因，或活性氧消除基因）；激活活性氧消除系統(tǒng)

敲除W63基因；過度表達W76基因（或b148基因，或活性氧消除基因）；激活活性氧消除系統(tǒng)

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