細(xì)胞周期分為間期與分裂期(M)兩個(gè)階段。間期又分為:G1期(DNA復(fù)制前期),S期(DNA復(fù)制后期)。以下是測(cè)定細(xì)胞周期三種常用方法,回答下列問(wèn)題:
(1)同位素標(biāo)記法:利用3H標(biāo)記的TDR(胸腺嘧啶脫氧核苷酸)標(biāo)記S期的細(xì)胞后,移至普通培養(yǎng)基中培養(yǎng),定期取樣檢測(cè)放射顯影,統(tǒng)計(jì)標(biāo)記細(xì)胞百分?jǐn)?shù),來(lái)計(jì)算細(xì)胞周期。
A:S期的細(xì)胞被標(biāo)記; B:標(biāo)記細(xì)胞進(jìn)入分裂期;C:標(biāo)記細(xì)胞第二次進(jìn)入分裂期
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)被標(biāo)記的物質(zhì)是DNADNA,該細(xì)胞分裂一次平均經(jīng)歷的時(shí)間大約為1010。
(2)BrdU滲入測(cè)定法:BrdU加入培養(yǎng)液后,做為細(xì)胞DNA復(fù)制的原料參與新DNA的合成,經(jīng)Giemsa染色后通過(guò)統(tǒng)計(jì)分裂相中各期比例,來(lái)算出細(xì)胞周期的值。
已知只有雙鏈均含BrdU的染色單體著色較淺,其他情況的染色單體著色較深?,F(xiàn)以1條染色體為例,觀察加入BrdU后細(xì)胞分裂中期的顯示情況,則在第3個(gè)周期,所產(chǎn)生的c細(xì)胞中一半細(xì)胞為兩條單體均淺染,另一半細(xì)胞為兩條單體一深一淺一深一淺;得出該結(jié)果依據(jù)了DNA的半保留半保留復(fù)制方式。
(3)流式細(xì)胞儀PI染色法:PI可以與DNA結(jié)合,其熒光強(qiáng)度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量,流式細(xì)胞儀可根據(jù)細(xì)胞中DNA含量的不同對(duì)細(xì)胞分別計(jì)數(shù),從而獲得對(duì)應(yīng)的細(xì)胞周期各時(shí)相的細(xì)胞百分率。若檢測(cè)的結(jié)果G1期DNA的相對(duì)含量為40,則G2期應(yīng)該是8080。
【答案】DNA;10;一深一淺;半保留;80
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:22引用:3難度:0.5
相似題
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1.科學(xué)家運(yùn)用密度梯度離心等方法研究DNA復(fù)制的機(jī)制。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)讓兩組大腸桿菌分別在15NH4Cl培養(yǎng)液和14NH4Cl培養(yǎng)液中繁殖多代,培養(yǎng)液中的氮可被大腸桿菌用于合成四種
(2)實(shí)驗(yàn)一:從含15N的大腸桿菌和含14N的大腸桿菌中分別提取親代DNA,混合后放在100℃條件下進(jìn)行熱變性處理,然后進(jìn)行密度梯度離心,再測(cè)定離心管中混合的DNA單鏈含量,結(jié)果如圖a所示。
熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中堿基對(duì)之間的
(3)實(shí)驗(yàn)二:研究人員將含15N的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到14NH4Cl培養(yǎng)液中,繁殖一代后提取子代大腸桿菌的DNA(F1DNA),將F1DNA熱變性處理后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)的兩個(gè)條帶對(duì)應(yīng)圖b中的兩個(gè)峰。若將未進(jìn)行熱變性處理的F1DNA進(jìn)行密度梯度離心,則離心管中只出現(xiàn)一個(gè)條帶。據(jù)此分析,F(xiàn)1DNA由
①兩條15N-DNA單鏈
②兩條14N-DNA單鏈
③兩條既含15N又含有14N的DNA單鏈
④一條15N-DNA單鏈、一條14N-DNA單鏈
⑤雙鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果只有一個(gè)條帶,排除“全保留復(fù)制”
⑥單鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果有兩個(gè)條帶,排除“彌散復(fù)制”
⑦圖b與圖a中兩個(gè)峰的位置相同,支持“半保留復(fù)制”發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.4 -
2.20世紀(jì),有科學(xué)家提出DNA分子半不連續(xù)復(fù)制假說(shuō):DNA分子復(fù)制時(shí),一條子鏈?zhǔn)沁B續(xù)形成的,另一條子鏈不連續(xù)即先形成短鏈片段(如圖1所示)后再連接成長(zhǎng)鏈片段。為驗(yàn)證該假說(shuō),科學(xué)家岡崎進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):讓T4噬菌體在20℃時(shí)侵染大腸桿菌70min后,將3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在15 s、30 s、60s、120 s時(shí),分離T4噬菌體 DNA并通過(guò)加熱使 DNA全部解旋,再進(jìn)行密度梯度離心,根據(jù) DNA 單鏈片段分布位置確定片段大小,發(fā)現(xiàn)DNA單鏈片段越小,離試管口距離越近。檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性強(qiáng)度,結(jié)果如圖2 所示。下列說(shuō)法正確的是( )
發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:8引用:1難度:0.7 -
3.某實(shí)驗(yàn)小組將大腸桿菌放在含有同位素15N的培養(yǎng)基中培養(yǎng)若干代后,大腸桿菌DNA中的所有氮均為15N,然后將被標(biāo)記的大腸桿菌再轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng),經(jīng)密度梯度離心后,測(cè)定其不同世代大腸桿菌DNA的密度,結(jié)果如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入
(2)若繼續(xù)測(cè)定第4代DNA分子的密度,則第4代DNA分子中含15N標(biāo)記的DNA分子所占的比例為
(3)科學(xué)家在研究DNA的復(fù)制方式時(shí)還提出了全保留復(fù)制和彌散復(fù)制模型。全保留復(fù)制模型認(rèn)為DNA復(fù)制后兩條母鏈DNA彼此結(jié)合,恢復(fù)原狀,新合成的兩條子鏈彼此互補(bǔ)結(jié)合形成一條新的DNA雙鏈;彌散復(fù)制模型認(rèn)為親代雙鏈被切成雙鏈片段,而這些片段又可以作為新合成雙鏈片段的模板,新、老雙鏈片段又以某種方式聚集形成“雜種鏈”。 分析如圖,根據(jù)第發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:11引用:2難度:0.7
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