新型冠狀病毒是一種RNA病毒，會(huì)導(dǎo)致人患嚴(yán)重的肺炎。目前官方已宣布完成了相關(guān)基因序列合成，重組質(zhì)粒構(gòu)建和工程菌篩選工作，并且研制的新型冠狀病毒疫苗已投入生產(chǎn)和使用，請(qǐng)聯(lián)系基因工程的相關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：
（1）新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S蛋白與宿主細(xì)胞表面的ACE2蛋白結(jié)合完成感染，在研制疫苗時(shí)需要先找到新冠病毒上S蛋白的基因（圖中黑色部分），具體做法是

以病毒的RNA為模板，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因

以病毒的RNA為模板，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因

，然后把微生物當(dāng)做培養(yǎng)基，生產(chǎn)出我們需要的S蛋白，之后做成疫苗?？刹捎?

PCR

PCR

獲取大量S蛋白的目的基因，該技術(shù)需要dNTP和

Taq

Taq

酶以及引物

①④

①④

（填圖中序號(hào)）等擴(kuò)增四輪需引物

30

30

個(gè)。

（2）為了保證擴(kuò)增的目的基因和表達(dá)載體的連接，應(yīng)在基因的上、下游和引物的5′端分別添加不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是

保證目的基因與載體正確連接，避免自身連接及反向連接等

保證目的基因與載體正確連接，避免自身連接及反向連接等

。
（3）

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，該結(jié)構(gòu)必須包括新型冠狀病毒S蛋白基因及啟動(dòng)子

終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)

終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)

（至少答出兩點(diǎn)），其中啟動(dòng)子的作用是

RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)

RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)

，設(shè)置該步驟的目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因表達(dá)并發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因表達(dá)并發(fā)揮作用

。