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遺傳毒性是指環(huán)境中的理化因素作用于有機(jī)體,使其遺傳物質(zhì)在染色體水平、分子水平和堿基水平上受到各種損傷,從而造成的毒性作用。研究人員通過基因工程改造大腸桿菌,以期待篩選出對遺傳毒性物質(zhì)反應(yīng)靈敏的工程菌株,用于水質(zhì)檢測。請回答下列問題:

(1)研究人員準(zhǔn)備在圖1所示的表達(dá)載體上添加SRR基因(噬菌體裂解基因)的啟動(dòng)子sul。圖2顯示了啟動(dòng)子sul內(nèi)部存在的限制酶切位點(diǎn),箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向。
①據(jù)圖1、2分析,提取啟動(dòng)子sul時(shí),在其A端和B端應(yīng)分別添加限制性內(nèi)切核酸酶
XhoⅠ和SapⅠ
XhoⅠ和SapⅠ
的酶切位點(diǎn),從而確保啟動(dòng)子sul可與已被酶切的表達(dá)載體正確連接。
②將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌,置于含有
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選、鑒定及擴(kuò)大培養(yǎng),獲得工程菌sul。
(2)改造成功的工程菌中的啟動(dòng)子sul中應(yīng)存在可被
遺傳毒性物質(zhì)
遺傳毒性物質(zhì)
激活的毒性響應(yīng)啟動(dòng)子序列。當(dāng)該序列被激活后,
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別并與啟動(dòng)子結(jié)合,驅(qū)動(dòng)SRR基因(噬菌體裂解基因)的
表達(dá)
表達(dá)
,表達(dá)產(chǎn)物可使大腸桿菌裂解。
(3)實(shí)驗(yàn)室中要擴(kuò)大培養(yǎng)工程菌sul,則一般選用
液體
液體
培養(yǎng)基(填“液體”或“固體”),原因是
液體培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣能與大腸桿菌充分接觸,大腸桿菌產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物能及時(shí)運(yùn)走,因而有利于大腸桿菌的生長
液體培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣能與大腸桿菌充分接觸,大腸桿菌產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物能及時(shí)運(yùn)走,因而有利于大腸桿菌的生長
。該培養(yǎng)基中一般會(huì)含有水、無機(jī)鹽、
碳源、氮源
碳源、氮源
等成分。

【考點(diǎn)】選擇培養(yǎng)基
【答案】XhoⅠ和SapⅠ;氨芐青霉素;遺傳毒性物質(zhì);RNA聚合酶;表達(dá);液體;液體培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣能與大腸桿菌充分接觸,大腸桿菌產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物能及時(shí)運(yùn)走,因而有利于大腸桿菌的生長;碳源、氮源
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:12引用:2難度:0.5
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    步驟1:乳酸菌的富集
    將發(fā)酵豆粕接種于添加了放線菌酮的液體培養(yǎng)基。
    步驟2:純化與鑒定
    取一定量的富集菌液,進(jìn)行梯度稀釋,接種于添加了碳酸鈣的培養(yǎng)基,挑選單菌落純化培養(yǎng)并鑒定菌種。
    步驟3:探究不同添加物對菌種發(fā)酵效果的影響
    下列分析正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/14 2:0:1組卷:33引用:6難度:0.6
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