胰島素是動物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì),可以用于治療糖尿病。將人的胰島素的基因在大腸桿菌中進行表達,可以實現(xiàn)高效生產(chǎn)。
(1)導入大腸桿菌中的胰島素基因取自人體細胞的 cDNA文庫cDNA文庫(填“基因組文庫”或“cDNA文庫”)。
(2)對胰島素基因進行擴增需利用 PCRPCR技術(shù),前提是要有 一段已知胰島素基因的核苷酸序列一段已知胰島素基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。擴增中的每一次循環(huán)可分為 變性—退火—延伸變性—退火—延伸三步。
(3)將胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞,最常用的轉(zhuǎn)化方法是用 Ca2+Ca2+處理細胞,使其成為 感受態(tài)感受態(tài)細胞,進而完成轉(zhuǎn)化過程。
(4)檢測大腸桿菌中胰島素基因是否翻譯成胰島素,方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交,科學家從大腸桿菌中提取了胰島素,但發(fā)現(xiàn)其并沒有生物活性,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析原因是 胰島素是真核細胞蛋白質(zhì),大腸桿菌是原核細胞,沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對真核細胞的蛋白質(zhì)進行加工修飾胰島素是真核細胞蛋白質(zhì),大腸桿菌是原核細胞,沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對真核細胞的蛋白質(zhì)進行加工修飾。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】cDNA文庫;PCR;一段已知胰島素基因的核苷酸序列;變性—退火—延伸;Ca2+;感受態(tài);抗原—抗體雜交;胰島素是真核細胞蛋白質(zhì),大腸桿菌是原核細胞,沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對真核細胞的蛋白質(zhì)進行加工修飾
【解答】
【點評】
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