許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ'基因，其編碼的產(chǎn)物B-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG 存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色．基因工程中常利用該原理從導(dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過程如圖．請據(jù)圖回答：
（1）基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，能遺傳給后代，并表達(dá)和發(fā)揮作用使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，能遺傳給后代，并表達(dá)和發(fā)揮作用．
（2）限制酶EcoRI的識別序列和切點 是-G′AATTC-，Sma I的識別序列和切點是-CCC′GGG-．圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是-TTAA-TTAA，連接過程中需要的基本工具是DNA連接酶DNA連接酶．
（3）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+Ca2+處理，使其處于能吸收周圍 DNA的狀態(tài)．
（4）菌落顏色為白色的是菌落③菌落③，原因是lacZ'標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出3-半乳糖苷酶，故菌落為白色lacZ'標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出3-半乳糖苷酶，故菌落為白色．
（5）菌落③中的目的基因是否能表達(dá)，可采用的檢測辦法是抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，能遺傳給后代，并表達(dá)和發(fā)揮作用；-TTAA；DNA連接酶；Ca2+；菌落③；lacZ'標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出3-半乳糖苷酶，故菌落為白色；抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：26引用：4難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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