如圖1表示培育出轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的部分流程,圖2是限制酶BamHⅠ和Sau3AⅠ識別的核苷酸序列及其切割位點?;卮鹣铝袉栴}。
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟:獲取目的基因獲取目的基因、構(gòu)建基因表達的載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定。
(2)據(jù)圖分析,若切割含目的基因的DNA和質(zhì)粒時,均使用1種酶進行切割,則切割含目的基因的DNA使用的限制酶是 Smu3AⅠSmu3AⅠ,切割質(zhì)粒使用的限制酶是 BamHⅠBamHⅠ。切割質(zhì)粒不使用另一種限制酶的原因是 Sau3AⅠ會破壞標記基因Sau3AⅠ會破壞標記基因。進行圖中①過程,除了用到限制酶以外,還需用到的酶是 DNA連接酶(或E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶)DNA連接酶(或E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶)。
(3)圖1中②過程需用鈣離子溶液處理大腸桿菌,目的是 使大腸桿菌處于容易從周圍環(huán)境中吸收DNA的狀態(tài)使大腸桿菌處于容易從周圍環(huán)境中吸收DNA的狀態(tài)。
(4)圖1中③過程,需將大腸桿菌接種到含有氯霉素的培養(yǎng)基上,原因很可能是 CmR基因為氯霉素抗性基因CmR基因為氯霉素抗性基因。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】獲取目的基因;目的基因的檢測與鑒定;Smu3AⅠ;BamHⅠ;Sau3AⅠ會破壞標記基因;DNA連接酶(或E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶);使大腸桿菌處于容易從周圍環(huán)境中吸收DNA的狀態(tài);CmR基因為氯霉素抗性基因
【解答】
【點評】
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