如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
| 限制酶 | BamHⅠ | EcoRⅠ | HindⅠ | NbeⅠ | MunⅠ |
| 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) | G↓CATCC | G↓AATTC | A↓AGCTT | G↓CTAGC | C↓AATTG |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】B；D
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（ChMmaA2），能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá)，產(chǎn)生的β甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長(zhǎng)度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入棉花細(xì)胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過程如圖。請(qǐng)分析回答：
（1）纖維細(xì)胞E6啟動(dòng)子的元素組成為，基因表達(dá)載體除了圖示組成外，至少還有等（至少答兩個(gè)），不能使用質(zhì)粒1中花椰菜病毒啟動(dòng)子的原因是。
（2）PCR技術(shù)擴(kuò)增β-甘露糖苷酶基因需要根據(jù)設(shè)計(jì)特異性引物序列，假設(shè)開始時(shí)模板DNA數(shù)量為m個(gè)，PCR擴(kuò)增5個(gè)循環(huán)，理論上需要的引物數(shù)量，只含目的基因的片段數(shù)量為。為保證ChMnaA2能插入到質(zhì)粒2中，還需要在引物的端添加限制酶識(shí)別序列。
（3）為什么不能用GhMnaA2探針進(jìn)行DNA分子雜交來鑒定基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞？。
（4）③過程中用酶切法可鑒定正、反義表達(dá)載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正義基因表達(dá)載體獲得0.1kb、3.2kb、5.8kb、8.6kb四種長(zhǎng)度的DNA片段，則用NotI酶切反義基因表達(dá)載體獲得DNA片段的長(zhǎng)度應(yīng)是和。
（5）導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維變長(zhǎng)的原理是。發(fā)布：2024/12/19 21:30:2組卷：36引用：3難度：0.5
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