肌肉生長抑制素（MSTN）是一種骨骼肌生長發(fā)育的負調控因子，可抑制肌細胞的增殖，MSTN基因沉默則可增加的方面?？蒲腥藛T通過構建MSTN基因的反義基因（其轉錄出的mRNA會與MSY。A因轉錄出的mRNA特異性結合）表達載體，將其是山羊胎兒纖維細胞，實現了人成纖維細胞中MSTN基因的沉默，再結合體細胞核移植技術，成功制備了轉基因。回答下列問題：
（1）利用PCR技術擴增MSTN基因的反義基因前提是要有 一段已知目的基因（或MSTN基因的反義基因）的核苷酸序列一段已知目的基因（或MSTN基因的反義基因）的核苷酸序列，以便合成引物。在PCR反應中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是 Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活。
（2）將MSTN基因的反義基因與質粒構建成目的基因表達載體時，所需要的兩種酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（3）將構建好的MSTN基因的反義基因表達載體導入山羊胎兒成纖維細胞，從中篩選反義基因成功表達的細胞。在成纖維細胞體外培養(yǎng)過程中會出現細胞貼壁和 接觸抑制接觸抑制現象，導致成纖維細胞的增殖不能一直進行。將具有反義基因的成纖維細胞注入經去核處理后的卵母細胞中，通過電刺激使二者融合，形成重組胚胎，去核的目的是 使重組胚胎的核遺傳物質完全來自具有反義基因的成纖維細胞使重組胚胎的核遺傳物質完全來自具有反義基因的成纖維細胞。
（4）用特定方法激活并促進重組胚胎細胞分裂和發(fā)育。在養(yǎng)殖過程中發(fā)現，公羊的肌肉量比母羊的更高，為獲得更多公羊，需在胚胎發(fā)育早期進行相關操作，具體操作是 選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，選擇雄性胚胎進行移植選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，選擇雄性胚胎進行移植。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】一段已知目的基因（或MSTN基因的反義基因）的核苷酸序列；Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活；限制酶和DNA連接酶；接觸抑制；使重組胚胎的核遺傳物質完全來自具有反義基因的成纖維細胞；選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，選擇雄性胚胎進行移植
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/25 1:0:8組卷：3引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3難度：0.7