花粉管通道法是由我國科學(xué)家周光宇于1979年首先提出和設(shè)計(jì)的。請(qǐng)回答下列問題:
(1)通過花粉管通道法將外源DNA(目的基因)導(dǎo)入胚囊之前,需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體。該過程需要工具酶、載體及外源DNA(目的基因)。如圖1為兩種不同限制酶識(shí)別的堿基序列及相應(yīng)的切割位點(diǎn),圖2為質(zhì)粒和目的基因。
①若將目的基因插入質(zhì)粒中,最好選擇的限制酶是 E.coRI和BamHIE.coRI和BamHI,理由是 二者切出的黏性末端不同,可防止自身環(huán)化現(xiàn)象(和反向連接的)發(fā)生二者切出的黏性末端不同,可防止自身環(huán)化現(xiàn)象(和反向連接的)發(fā)生。
②基因工程中,目的基因可利用反轉(zhuǎn)錄法來合成,該過程需要 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶催化;也可用PCR合成儀合成,這一過程需要向該儀器中加入 TaqTaq酶、22種引物、4種脫氧核苷酸等。
③構(gòu)建的基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子的作用是 與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合并驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合并驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄;標(biāo)記基因的作用是 為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來。
(2)培養(yǎng)一段時(shí)間后,原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁而成為完整的植物細(xì)胞,與細(xì)胞壁再生有關(guān)的細(xì)胞器是 高爾基體(和線粒體)高爾基體(和線粒體)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】E.coRI和BamHI;二者切出的黏性末端不同,可防止自身環(huán)化現(xiàn)象(和反向連接的)發(fā)生;逆轉(zhuǎn)錄酶;Taq;2;與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合并驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄;為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來;高爾基體(和線粒體)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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