纖維素酶是繼淀粉酶和蛋白酶之后的全球第三大工業(yè)用酶制劑,被廣泛地應(yīng)用于生物能源、食品,造紙。紡織洗滌,醫(yī)藥、動(dòng)物飼料以及農(nóng)業(yè)廢棄物處理等領(lǐng)域。
(1)某校園興趣小組設(shè)計(jì)了A,B兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)表),試圖從土壤中篩選出產(chǎn)纖維素酶的微生物。培養(yǎng)基A從物理狀態(tài)看屬于 固體固體培養(yǎng)基,目的是 從土壤中篩選出纖維素分解菌從土壤中篩選出纖維素分解菌。培養(yǎng)基B 不能不能 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 培養(yǎng)基B以淀粉為主要碳源,纖維素分解菌和其它微生物都能生長(zhǎng)繁殖,不能用于分離和鑒別纖維素分解菌培養(yǎng)基B以淀粉為主要碳源,纖維素分解菌和其它微生物都能生長(zhǎng)繁殖,不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。
成分種類(lèi) | 酵母膏 | 無(wú)機(jī)鹽 | 淀粉 | 纖維素粉 | CR溶液 | 瓊脂 | 水 |
培養(yǎng)基A | + | + | + | + | - | + | + |
培養(yǎng)基B | + | + | + | - | + | + | + |
(2)用選擇培養(yǎng)基選育高產(chǎn)纖維素酶菌株時(shí),應(yīng)選擇培養(yǎng)基中
透明圈直徑
透明圈直徑
與菌落直徑比值大的菌落。(3)為純化纖維素酶,科研人員進(jìn)行如圖操作:
透析處理的目的是
除去小分子雜質(zhì)
除去小分子雜質(zhì)
。粗提物中包含纖維素酶及其他雜蛋白。請(qǐng)寫(xiě)出一種純化得到纖維素酶的方法及其純化原理:凝膠色譜法,原理:根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的不同,將纖維素酶與雜蛋白分離(或電泳法,原理:蛋白質(zhì)之間由于電荷、分子大小的差異產(chǎn)生不同的電泳速度,將纖維素酶與雜蛋白分離)
凝膠色譜法,原理:根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的不同,將纖維素酶與雜蛋白分離(或電泳法,原理:蛋白質(zhì)之間由于電荷、分子大小的差異產(chǎn)生不同的電泳速度,將纖維素酶與雜蛋白分離)
。(4)經(jīng)培養(yǎng)和篩選,興趣小組分離純化得到纖維素酶A和纖維素酶B。為比較兩類(lèi)纖維素酶的活性大小,請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路:
取三支試管分別加入等量的緩沖液,向三支試管中分別加入等量的蒸餾水、纖維素酶A、纖維素酶B,然后再向三支試管中分別加入等量的纖維素溶液,一段時(shí)間后,再向三支試管中分別加入等量的斐林試劑,水浴加熱觀察三支試管顏色變化。試管中生成的磚紅色沉淀越多,說(shuō)明纖維素水解生成的還原糖越多,纖維素酶的活性越高
取三支試管分別加入等量的緩沖液,向三支試管中分別加入等量的蒸餾水、纖維素酶A、纖維素酶B,然后再向三支試管中分別加入等量的纖維素溶液,一段時(shí)間后,再向三支試管中分別加入等量的斐林試劑,水浴加熱觀察三支試管顏色變化。試管中生成的磚紅色沉淀越多,說(shuō)明纖維素水解生成的還原糖越多,纖維素酶的活性越高
(提供緩沖液、纖維素酶A液、纖維素酶B液、斐林試劑等)。【答案】固體;從土壤中篩選出纖維素分解菌;不能;培養(yǎng)基B以淀粉為主要碳源,纖維素分解菌和其它微生物都能生長(zhǎng)繁殖,不能用于分離和鑒別纖維素分解菌;透明圈直徑;除去小分子雜質(zhì);凝膠色譜法,原理:根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的不同,將纖維素酶與雜蛋白分離(或電泳法,原理:蛋白質(zhì)之間由于電荷、分子大小的差異產(chǎn)生不同的電泳速度,將纖維素酶與雜蛋白分離);取三支試管分別加入等量的緩沖液,向三支試管中分別加入等量的蒸餾水、纖維素酶A、纖維素酶B,然后再向三支試管中分別加入等量的纖維素溶液,一段時(shí)間后,再向三支試管中分別加入等量的斐林試劑,水浴加熱觀察三支試管顏色變化。試管中生成的磚紅色沉淀越多,說(shuō)明纖維素水解生成的還原糖越多,纖維素酶的活性越高
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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