反義RNA可以抑制特定基因的表達,反義RNA技術可用于分析或鑒定植物基因的功能。實驗小組將番茄的pTOM5基因通過特殊的農桿菌反向導入番茄細胞中,結果發(fā)現(xiàn)番茄果實呈黃色,原因是類胡蘿卜素的合成受阻。反義RNA技術的原理如圖所示,回答下列問題:
(1)基因工程中通常采用 PCRPCR技術體外擴增pTOM5基因。將pTOM5基因和煙草病毒載體構建重組載體時需要的酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,將重組病毒載體TRV2導入農桿菌前要用Ca2+處理農桿菌,其目的是 使農桿菌處于易于接受外源DNA分子的感受態(tài)使農桿菌處于易于接受外源DNA分子的感受態(tài)。
(2)在基因工程中,轉化是指 目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。普通農桿菌能將自身Ti質粒的T-DNA片段插入宿主細胞的染色體的DNA上。據圖可知,特殊農桿菌與普通農桿菌的區(qū)別在于 無須將目的基因整合到T-DNA上,而直接將外源基因的重組病毒載體導入植物細胞,同時不會轉入Ti質粒無須將目的基因整合到T-DNA上,而直接將外源基因的重組病毒載體導入植物細胞,同時不會轉入Ti質粒。
(3)據圖可知,反義RNA技術可抑制pTOM5基因表達的 翻譯翻譯過程,根據實驗結果可知,pTOM5基因控制合成的產物可能是 控制類胡蘿卜素合成的酶控制類胡蘿卜素合成的酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】PCR;限制酶和DNA連接酶;使農桿菌處于易于接受外源DNA分子的感受態(tài);目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程;無須將目的基因整合到T-DNA上,而直接將外源基因的重組病毒載體導入植物細胞,同時不會轉入Ti質粒;翻譯;控制類胡蘿卜素合成的酶
【解答】
【點評】
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