馬鈴薯是我國重要的糧食作物之一，致病疫霉導(dǎo)致的晚疫病及干旱、高低溫和鹽脅迫等是導(dǎo)致其減產(chǎn)的重要原因。研究人員為探究StNPR4和StproNPR4基因在馬鈴薯應(yīng)對生物脅迫和非生物脅迫中的功能進(jìn)行了相關(guān)實驗，基因表達(dá)載體構(gòu)建示意圖如圖。
回答下列問題：
（1）用SacⅡ等限制酶切割含目的基因的DNA片段，與經(jīng)相同酶切割后的pENTR-L16質(zhì)粒用 DNA連接DNA連接酶連接，構(gòu)建重組pENTR-L16。
（2）經(jīng) SacII和Kpn1SacII和Kpn1酶將含目的基因的片段切出并連接到載體pOREO4上構(gòu)建重組pOREO4。
（3）經(jīng) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組pOREO4導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，得到5個轉(zhuǎn)化品系，命名為1、2、3、4和5。
A.馬鈴薯基因相對表達(dá)量分析；B.馬鈴薯接種致病疫霉后病原菌相對生物量分析；C.150mmol?L-1的NaCl處理對馬鈴薯快繁生根率的影響；**表示組別間差異達(dá)到極顯著水平
（4）①通過 分子雜交技術(shù)（PCR技術(shù)）分子雜交技術(shù)（PCR技術(shù)）等技術(shù)，檢測 轉(zhuǎn)基因不同品系轉(zhuǎn)基因不同品系的目的基因轉(zhuǎn)錄水平。據(jù)圖A分析，只有轉(zhuǎn)基因品系 55的表達(dá)量顯著低于野生型（WT）和其余4個轉(zhuǎn)化品系，因此后續(xù)試驗不再檢測此品系。②據(jù)圖B和圖C分析：這樣的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的表達(dá)策略優(yōu)勢是 具有抗病性，致病疫霉相對生物量低；生根率高，存活能力強(qiáng)具有抗病性，致病疫霉相對生物量低；生根率高，存活能力強(qiáng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA連接；SacII和Kpn1；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；分子雜交技術(shù)（PCR技術(shù)）；轉(zhuǎn)基因不同品系；5；具有抗病性，致病疫霉相對生物量低；生根率高，存活能力強(qiáng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：3難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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