近期,以武漢地區(qū)為中心爆發(fā)了新型冠狀病毒(2019-nCoV)病例,該病毒是具外套膜的正鏈單股RNA病毒。目前,對于該病毒的檢測手段主要為利用熒光PCR試劑盒對其核酸進行檢 測。其原理是,通過提取病人樣本中的RNA,進行反轉錄?聚合酶鏈式反應(RT-PCR,即先通 過逆轉錄獲得cDNA,然后以其為模板進行 PCR),通過擴增反應將樣本中微量的病毒信息加以放大,最后以熒光的方式讀取信號。如果PCR之后信號為陽性,那么就可說樣本中存在著病毒(已經感染),反之則說明沒有感染。
(1)PCR擴增時在加入一對引物的同時還需加入一個特異性的熒光探針,其兩端分別標記一個報告基團和一個淬滅基團。如圖所示,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅 基團吸收;Taq酶在催化子鏈延伸時,還具有外切酶活性,它可以沿著5’→3’5’→3’(填“5'→3'”或“3'→5'”)方向將探針酶切降解,使報告基團和淬滅基團分離。于是,隨 著DNA擴增次數的增加,熒光的強度會逐漸增大增大(填“增大”或“減小”),從而 實現了熒光信號的變化與PCR產物的形成完全同步。
(2)目前2019-nCoV的全基因組序列測定已完成,這有利于我們在研發(fā)病毒核酸檢測試劑 盒時根據其基因組序列來設計引物和(熒光)探針引物和(熒光)探針。
(3)此外,對新型冠狀病毒感染的診斷還可以通過抗體檢測,這需要利用動物細胞工程中的生產單克隆抗體生產單克隆抗體技術,其優(yōu)點為特異性強、靈敏度高、可大量制備特異性強、靈敏度高、可大量制備。
(4)為了預防、控制該病的發(fā)生、流行,科學人員正在緊急研發(fā)相應的疫苗,其中利用滅活的病毒制備的疫苗稱為滅活疫苗,這里的“滅活”是指利用物理或化學手段使病毒失 去感染能力感染能力,但是并不破壞病原體的抗原結構抗原結構。此外,還可以利用基因工程基因工程 技術來 表達抗原蛋白,以大規(guī)模生產疫苗。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】5’→3’;增大;引物和(熒光)探針;生產單克隆抗體;特異性強、靈敏度高、可大量制備;感染能力;抗原結構;基因工程
【解答】
【點評】
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