Cre/loxP重組酶系統(tǒng)是在基因或染色體水平上對生物基因進行遺傳改造的一種技術(shù)，可以在DNA的特定序列進行定點切割和重新連接。請回答下列問題：
（1）圖1是利用Cre/loxP酶系統(tǒng)敲除基因的過程。loxP序列具有方向性，由中間的間隔序列和兩側(cè)的反向重復序列組成，其中決定方向的序列是 間隔序列間隔序列。圖1中一條DNA片段上待敲除基因的兩端存在同向loxP序列，Cre酶能識別并結(jié)合到loxP序列的反向重復序列區(qū)，定點切斷間隔序列的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵，從而實現(xiàn)目標基因的敲除，敲除的基因片段會形成 環(huán)狀環(huán)狀（填“線狀”或“環(huán)狀”）結(jié)構(gòu)。若經(jīng)Cre酶作用使得2個loxP位點間的序列發(fā)生反轉(zhuǎn)，其原因可能是 兩個loxP序列方向相反兩個loxP序列方向相反。
（2）Cre/loxP酶系統(tǒng)可以調(diào)控基因的表達，在目的基因 上游上游（填“上游”或“下游”）插入一個帶有l(wèi)oxP位點的編碼終止密碼子的序列，在Cre酶存在的情況下，目的基因 表達表達（填“表達”或“不表達”）。
（3）圖2是利用Cre/loxP酶系統(tǒng)構(gòu)建融合基因的過程。首先分別擴增Bt基因和Bar基因，以獲得所需要的DNA片段，然后用Cre/loxP酶系統(tǒng)處理連接后的DNA片段，獲得Bt-Bar融合基因片段。PCR1過程中，所用的2種引物的結(jié)合位置分別在 啟動子外側(cè)和終止子內(nèi)側(cè)（啟動子和終止子的左側(cè)）啟動子外側(cè)和終止子內(nèi)側(cè)（啟動子和終止子的左側(cè)）；該過程中，還需添加的物質(zhì)有 TaqDNA聚合酶、dNTP、（含Mg2+）緩沖液等TaqDNA聚合酶、dNTP、（含Mg2+）緩沖液等（至少寫2種）等。有研究表明，大多數(shù)限制酶對裸露的位點不能識別切割，因此必須對識別序列5'末端進行修飾并加上一個至幾個保護堿基，如GGG。由此推測，對Bar基因引物5′端序列的要求是 引物的5'端均要連接上loxP序列，并在末端加上保護堿基序列（GGG）引物的5'端均要連接上loxP序列，并在末端加上保護堿基序列（GGG）。
【答案】間隔序列；磷酸二酯鍵；環(huán)狀；兩個loxP序列方向相反；上游；表達；啟動子外側(cè)和終止子內(nèi)側(cè)（啟動子和終止子的左側(cè)）；TaqDNA聚合酶、dNTP、（含Mg2+）緩沖液等；引物的5'端均要連接上loxP序列，并在末端加上保護堿基序列（GGG）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/11 8:0:9組卷：28引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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