如圖1是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程.請(qǐng)分析回答:
(1)過(guò)程①使用的限制酶限制酶酶能使特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵(化學(xué)鍵)斷開(kāi).運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則而結(jié)合. 過(guò)程②需要用到DNA連接DNA連接酶.
(2)圖中A的名稱是重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒,A上應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)干擾素基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為啟動(dòng)子啟動(dòng)子.
(3)為直接檢測(cè)干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄,可從細(xì)胞中提取RNARNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作的探針進(jìn)行分子雜交分子雜交.
(4)利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的,以便根據(jù)這一序列合成引物引物,除了該物質(zhì)和目的基因外,擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合(Taq酶)耐高溫的DNA聚合(Taq酶)酶,并適時(shí)調(diào)整溫度,才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng).
(5)在該工程中所用的基因“剪刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是-GGATCC-.請(qǐng)?jiān)趫D2中畫(huà)出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過(guò)程圖.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】限制酶;磷酸二酯鍵;DNA連接;重組質(zhì)粒;啟動(dòng)子;RNA;分子雜交;引物;耐高溫的DNA聚合(Taq酶)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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