為更好地利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米，科學(xué)家將基因編輯系統(tǒng)引入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒對(duì)其進(jìn)行改造。
（1）Ti質(zhì)粒在基因工程中常作為 載體載體。改造后的Ti質(zhì)粒的部分序列如圖1所示，轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞后，gRNA能夠與玉米細(xì)胞DNA特定位點(diǎn)結(jié)合，從而引導(dǎo)Cas9蛋白在此位點(diǎn)切斷 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷開DNA。HR1和HR2與玉米DNA切斷位點(diǎn)上下游序列同源，玉米細(xì)胞能以同源序列之間的序列為模板合成一段DNA，連接斷開的DNA分子，實(shí)現(xiàn)外源片段插入。圖1中插入玉米染色體的片段能穩(wěn)定表達(dá)和擴(kuò)增，其他區(qū)域的基因只能瞬時(shí)表達(dá)且無法擴(kuò)增。在轉(zhuǎn)化玉米的過程中，使用改造后的Ti質(zhì)粒的優(yōu)點(diǎn)是 能夠在特定位點(diǎn)插入基因片段能夠在特定位點(diǎn)插入基因片段。
（2）用上述改造后的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米幼胚，在培養(yǎng)基中加入除草劑或 卡那霉素卡那霉素均能篩選出已發(fā)生轉(zhuǎn)化的幼胚。
（3）標(biāo)記基因插入轉(zhuǎn)基因作物染色體中往往會(huì)影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育，并帶來環(huán)境安全隱患?，F(xiàn)要制備轉(zhuǎn)耐寒CXE20基因的轉(zhuǎn)基因玉米，請(qǐng)利用該方法設(shè)計(jì)Ti質(zhì)粒相關(guān)序列，選擇相關(guān)基因的序號(hào)填入Ti質(zhì)粒部分序列示意圖。 
。
①Cas9 ②gRNA ③HRA ④NPTⅡ⑤CXE20 ⑥HR1 ⑦HR2
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】載體；磷酸二酯；能夠在特定位點(diǎn)插入基因片段；卡那霉素；
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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