圖甲中的三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列與切割位點，圖乙為某種基因表達載體示意圖（載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的）。利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素時，需用到圖乙所示質(zhì)粒以及圖甲所示的有關(guān)酶。請回答下列問題：
（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有①②③④①②③④（多選題，填序號）。
①能自我復(fù)制 ②具有標(biāo)記基因 ③能啟動外源目的基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯 ④含有多個酶切位點
（2）可以從下列哪些人體細胞中獲取生產(chǎn)人胰島素的目的基因①②③①②③（多選題，填序號）。
①消化道黏膜上皮細胞 ②胰島A細胞 ③胰島B細胞 ④成熟紅細胞
（3）經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因能能（填“能”或“不能”）與圖乙所示質(zhì)粒被Sau3AⅠ酶切后的產(chǎn)物連接，理由是Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同。
（4）將人胰島素基因與圖乙所示質(zhì)粒所拼接的重組質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，檢測目的基因是否導(dǎo)入成功，可用含有四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基進行初步篩選。目的基因成功表達的標(biāo)志是合成胰島素合成胰島素。
（5）已知圖乙所示質(zhì)粒經(jīng)EcoRⅠ和Sau3AⅠ聯(lián)合酶切后形成2.0kb和4.2kb（lkb=1000對堿基）兩種DNA片段。若將0.8kb的單個基因插在質(zhì)粒的Sau3AⅠ位點處，所形成的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ和Sau3AⅠ聯(lián)合酶切后，能形成的DNA片段長度分別為4.2kb、0.8kb、2kb4.2kb、0.8kb、2kb。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】①②③④；①②③；能；Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；四環(huán)素；合成胰島素；4.2kb、0.8kb、2kb
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.6
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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