某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有 能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因(答出兩點(diǎn)即可)。
而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動(dòng)子和終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是 二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng);并且 含有質(zhì)粒載體含有質(zhì)粒載體和 含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是 二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有 四環(huán)素四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。
(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來(lái)自于 受體細(xì)胞受體細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因;二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長(zhǎng);含有質(zhì)粒載體;含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒;二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng);四環(huán)素;受體細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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