有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關(guān),科學(xué)家將該基因?qū)胄∈篌w內(nèi),統(tǒng)計(jì)其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關(guān)限制酶酶切位點(diǎn),該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同(T、U視為相同的堿基),圖2為質(zhì)粒簡(jiǎn)圖,請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題:
(1)科學(xué)家首先采用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。PCR-過(guò)程中有兩次升溫一次降溫,其中降溫的目的是讓兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合讓兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。
(2)科學(xué)家在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程時(shí),目的基因應(yīng)插在啟動(dòng)子啟動(dòng)子和終止子終止子之間才能正常表達(dá)。單獨(dú)使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產(chǎn)生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)約一半的細(xì)胞中沒(méi)有檢測(cè)到CDKN2B蛋白,原因是部分基因反向連接部分基因反向連接。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生,應(yīng)對(duì)以上方法進(jìn)行改進(jìn),改進(jìn)措施為同時(shí)用PstⅠ,EcoRI分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切同時(shí)用PstⅠ,EcoRI分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切。
(3)若想讓一個(gè)轉(zhuǎn)入了自的基因的受精卵發(fā)育成多個(gè)個(gè)體,可以采用胚胎分割胚胎分割技術(shù),操作時(shí)應(yīng)注意做到將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】讓兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合;啟動(dòng)子;終止子;部分基因反向連接;同時(shí)用PstⅠ,EcoRI分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切;胚胎分割;將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:1難度:0.7
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