牛的雄性胚胎中存在特異性的H-Y抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。為研制H-Y單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了如圖實(shí)驗(yàn)流程。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題:
(1)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物通過(guò)分泌的乳汁來(lái)生產(chǎn)所需要的藥品,稱(chēng)為乳腺生物反應(yīng)器。將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,通過(guò)顯微注射顯微注射的方法,導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵受精卵中,然后使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
(2)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射H-Y抗原,該處理的目的是誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌H-Y抗體的B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌H-Y抗體的B淋巴細(xì)胞。
(3)實(shí)踐中常用聚乙二醇聚乙二醇作為促融劑,以提高細(xì)胞融合的成功率。
(4)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液。
(5)研究發(fā)現(xiàn),在小鼠細(xì)胞內(nèi)DNA的合成有兩條途徑,主要途徑(簡(jiǎn)稱(chēng)D途徑)是在細(xì)胞內(nèi)由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸,進(jìn)而合成DNA的過(guò)程,該過(guò)程中葉酸必不可少,氨基蝶呤是葉酸的拮抗劑,可以阻斷此途徑;另一輔助途徑(簡(jiǎn)稱(chēng)S途徑)是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成DNA,骨髓瘤細(xì)胞缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶。
①圖中篩選1利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的氨基蝶呤氨基蝶呤具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上增殖,其原因是缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶。
②圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是抗體與抗原特異性結(jié)合抗體與抗原特異性結(jié)合,篩選的目的是獲得能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)獲得能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)。
(6)通常選用囊胚期的早期胚胎做雌雄鑒別,鑒別后的雌性雌性胚胎符合要求,可做胚胎移植。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】啟動(dòng)子;顯微注射;受精卵;誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌H-Y抗體的B淋巴細(xì)胞;聚乙二醇;取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液;氨基蝶呤;缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶;抗體與抗原特異性結(jié)合;獲得能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì);雌性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:2難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的T淋巴細(xì)胞 B.經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞 C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱 D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè) 發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒(méi)有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
A.單克隆抗體制備過(guò)程中需要使用Taq酶 B.ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的運(yùn)輸方式為協(xié)助擴(kuò)散 C.溶酶體破裂導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞死亡 D.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力 發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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