為培育香型抗稻瘟病水稻，研究者利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)（機(jī)理如圖1），將含有Cas9和gRNA基因的表達(dá)載體（如圖2）導(dǎo)入水稻，定向敲除香味抑制基因Badh2、感稻瘟病基因Pi21。
（1）CRISPR-Cas9系統(tǒng)能精準(zhǔn)敲除靶基因，其作用機(jī)理是gRNA與靶基因進(jìn)行 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)；Cas9蛋白可催化 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵（填化學(xué)鍵名稱）水解，剪切特定DNA片段，被切割的DNA修復(fù)時(shí)會(huì)引起 基因突變基因突變（變異類型），導(dǎo)致基因失活。
（2）研究者用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將CRISPR-Cas9表達(dá)載體導(dǎo)入水稻愈傷組織。為篩選成功導(dǎo)入表達(dá)載體的水稻愈傷組織，培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素。
（3）為研究水稻的靶點(diǎn)突變情況，提取 潮霉素抗性植株的DNA潮霉素抗性植株的DNA，并設(shè)計(jì) Badh2和Pi21的特異性引物Badh2和Pi21的特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序分析，獲得Pi21-Badh2雙基因突變雜合株系。
（4）將Pi21-Badh2雙基因突變雜合株系 自交自交，以獲得不含轉(zhuǎn)基因成分（無T-DNA）的純合突變植株。
①子代中，Pi21-Badh2雙基因突變純合子的概率為1/16，則兩基因的位置關(guān)系為：非同源染色體上的非等位基因非同源染色體上的非等位基因。
②對(duì)純合突變植株利用Cas9的引物進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果如圖3，應(yīng)選取植株 2、5、6、72、5、6、7對(duì)突變基因做進(jìn)一步的功能鑒定。從生物安全的角度，闡明選擇的理由：若不去除該基因編輯系統(tǒng)，其持續(xù)發(fā)揮作用，可能會(huì)對(duì)基因再編輯、破壞遺傳穩(wěn)定性若不去除該基因編輯系統(tǒng)，其持續(xù)發(fā)揮作用，可能會(huì)對(duì)基因再編輯、破壞遺傳穩(wěn)定性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】堿基互補(bǔ)配對(duì)；磷酸二酯鍵；基因突變；潮霉素；潮霉素抗性植株的DNA；Badh2和Pi21的特異性引物；自交；非同源染色體上的非等位基因；2、5、6、7；若不去除該基因編輯系統(tǒng)，其持續(xù)發(fā)揮作用，可能會(huì)對(duì)基因再編輯、破壞遺傳穩(wěn)定性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：17引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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