科學(xué)家對乳酸脫氫酶（LDH）進(jìn)行了改造，使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：
（1科學(xué)家改造乳酸脫氫酶時(shí)需要做的第一步是

預(yù)期蛋白質(zhì)的功能或預(yù)期改造后的乳酸脫氫酶的功能

預(yù)期蛋白質(zhì)的功能或預(yù)期改造后的乳酸脫氫酶的功能

。研究發(fā)現(xiàn)，要將LDH基因改造成為mLDH（改造后的乳酸脫氫酶）基因，需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
①先將LDH基因片段連人載體中，形成環(huán)狀質(zhì)粒（如圖1）。

將突變后的序列設(shè)計(jì)在引物1中，以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的

模板

模板

，再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、

引物2

引物2

，以及堿基替換了的引物擴(kuò)增LDH基因，PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè)，需要用

DNA連接酶

DNA連接酶

酶將產(chǎn)物兩端連接，獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
（2）產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與?，F(xiàn)需要構(gòu)建同時(shí)含有mLDH、FDH的基因表達(dá)載體。請你根據(jù)圖2，提出將兩個(gè)基因依次連入載體的思路：

先用NdeⅠ和XhoⅠ酶切割質(zhì)粒2和空載體，將FDH基因與載體連接獲得連接產(chǎn)物，再用NcoI和BamHⅠ酶切質(zhì)粒1和上一步中的連接產(chǎn)物，將mLDH基因與載體連接獲得基因表達(dá)載體（或先用NcoⅠ和BamHⅠ酶切割質(zhì)粒1和空載體，將mLDH基因與載體連接獲得連接產(chǎn)物，再用NdeI和XhoⅠ酶切割質(zhì)粒2和上一步中的連接產(chǎn)物，將FDH基因與載體連接獲得基因表達(dá)載體）

先用NdeⅠ和XhoⅠ酶切割質(zhì)粒2和空載體，將FDH基因與載體連接獲得連接產(chǎn)物，再用NcoI和BamHⅠ酶切質(zhì)粒1和上一步中的連接產(chǎn)物，將mLDH基因與載體連接獲得基因表達(dá)載體（或先用NcoⅠ和BamHⅠ酶切割質(zhì)粒1和空載體，將mLDH基因與載體連接獲得連接產(chǎn)物，再用NdeI和XhoⅠ酶切割質(zhì)粒2和上一步中的連接產(chǎn)物，將FDH基因與載體連接獲得基因表達(dá)載體）

（要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序）。

（3）上述科學(xué)實(shí)踐屬于生物工程中的

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

工程。在生命科學(xué)高速發(fā)展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些紅線不能觸碰，請你舉出一例我國明令禁止的生物工程應(yīng)用：

生殖性克隆、基因編輯定制嬰兒或用生物工程制作生物武器等

生殖性克隆、基因編輯定制嬰兒或用生物工程制作生物武器等

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