枸杞子是應用極為廣泛的一種中藥飲片，李時珍在《本草綱目》中把枸杞子的主要功效為“滋腎、潤肺、明目”，又曰“久服，堅筋骨，輕身不老，耐寒暑”。我國對中藥飲片中的微生物含量有明確規(guī)定，為調查某家藥店在售枸杞子的耐熱菌污染情況，進行如下實驗：
步驟一：取枸杞子樣品25g,加入pH為7.0的氯化鈉蛋白胨緩沖液225mL，用無菌紗布過濾制備成待測液。
步驟二：對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻。
步驟三：取10mL待測液，接種至100mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
步驟四：以10倍梯度依次稀釋4次，取1ml劃線接種于胰酪大豆胨平板上，培養(yǎng)72h。
步驟五：觀察并進行計數。
回答問題：
（1）微生物計數的常用方法有 顯微鏡直接計數法顯微鏡直接計數法、稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法，后者測量值比實際值偏小。
（2）將步驟二補充完整 對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻。
（3）步驟三的目的是 選擇培養(yǎng)，增大耐熱菌的濃度選擇培養(yǎng)，增大耐熱菌的濃度。步驟四所用的培養(yǎng)基比步驟三增加 瓊脂瓊脂成分，需對培養(yǎng)基進行滅菌。
（4）計數不同微生物需采用不同的稀釋倍數，其目的是 保證獲得菌落數在30～300之間、適于計數的平板保證獲得菌落數在30～300之間、適于計數的平板。
（5）為減小實驗誤差，可采取的措施有 至少涂布三個平板，取平均值至少涂布三個平板，取平均值，若每個平板上的平均菌落數為M個，則計算樣品所含耐熱菌數的公式為 （M×106）÷25（M×106）÷25（個/g）。
【答案】對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻；顯微鏡直接計數法；稀釋涂布平板法；對待測液進行沸水浴一段時間，并快速冷卻；選擇培養(yǎng)，增大耐熱菌的濃度；瓊脂；保證獲得菌落數在30～300之間、適于計數的平板；至少涂布三個平板，取平均值；（M×106）÷25
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：1引用：1難度：0.7
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規(guī)律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數時，計數方法有稀釋涂布平板法和直接計數法．在用稀釋涂布平板法進行計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6難度：0.5