含有限制酶的細胞中通常還具有相應的甲基化酶,這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進行修飾,使限制酶不能對這一序列進行識別和切割。回答下列問題:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是從原核原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中需要使用DNA連接酶的是基因組文庫和cDNA文庫基因組文庫和cDNA文庫(填“基因組文庫”“cDNA文庫”或“基因組文庫和cDNA文庫”)。
(2)含有某種限制酶的細胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破壞細胞自身的DNA,其原因可能有①細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列;②甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾。
(3)利用PCR擴增目的基因的過程由高溫變性(90~95℃)、低溫復性(55~60℃)、適溫延伸(70-75℃)三個步驟構(gòu)成一個循環(huán),為使得DNA聚合酶能夠重復利用,選用的酶應在90-9590-95℃處理后仍然 具備催化活性。
(4)在PCR擴增目的基因時,為實現(xiàn)序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記,反應體系中添加的原料應包括堿基已被標記的dATPdATP (填“腺嘌呤核糖核苷酸”、“dATP”或“ATP”)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】原核;基因組文庫和cDNA文庫;細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列;甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾;90-95;dATP
【解答】
【點評】
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