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λ噬菌體的遺傳物質(zhì)是雙鏈線狀DNA,其DNA兩端的5′端是由12個(gè)堿基組成的互補(bǔ)黏性末端(cos位點(diǎn)),常作為基因工程的載體,轉(zhuǎn)化頻率比質(zhì)粒高1000倍以上。如圖是置換型λ噬菌體基因組的結(jié)構(gòu)和連接過(guò)程的示意圖,如表是若干種限制酶及其識(shí)別的序列,箭頭處表示酶切位點(diǎn)。填充片段用于置換目的基因片段,其兩端含有多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)。回答下列問(wèn)題:
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ MobⅠ AclⅠ
識(shí)別的序列 G↓GATCC G↓AATTC ↓GATC AA↓CGTT
(1)λ噬菌體特異性感染大腸桿菌后,其DNA會(huì)迅速形成閉環(huán)結(jié)構(gòu),能形成閉環(huán)結(jié)構(gòu)的原因是
λ噬菌體DNA兩端的cos位點(diǎn)可堿基互補(bǔ)配對(duì)相互連接
λ噬菌體DNA兩端的cos位點(diǎn)可堿基互補(bǔ)配對(duì)相互連接
。XbaⅠ識(shí)別的堿基序列是
5′-CTCGAG-3′
5′-CTCGAG-3′
。過(guò)程②利用
DNA聚合
DNA聚合
酶補(bǔ)平黏性末端,加入的核苷酸是
胸腺嘧啶脫氧核苷酸、胞嘧啶脫氧核苷酸
胸腺嘧啶脫氧核苷酸、胞嘧啶脫氧核苷酸
。
(2)置換載體用XbaⅠ切割并用脫氧核苷酸補(bǔ)平后,外源目的基因用表中的限制酶
BamHⅠ或MobⅠ
BamHⅠ或MobⅠ
處理,再用腺嘌呤脫氧核苷酸、鳥嘌呤脫氧核苷酸補(bǔ)平,經(jīng)DNA連接酶處理后可將目的基因替換到λ噬菌體上。與不補(bǔ)平黏性末端相比,上述操作方法的優(yōu)點(diǎn)是可以避免
①酶切后的λ噬菌體DNA的兩個(gè)末端相連接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾連接
①酶切后的λ噬菌體DNA的兩個(gè)末端相連接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾連接
(答出兩點(diǎn)即可),從而提高目的基因與載體相連接的效率。
(3)表面展示技術(shù)是通過(guò)重組DNA技術(shù),將外源蛋白與細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)組裝成融合蛋白,從而可展示在細(xì)胞表面。凝集素與脂多糖結(jié)合,可發(fā)生凝集反應(yīng)。研究人員將特異性識(shí)別藍(lán)細(xì)菌表面脂多糖的凝集素(一種蛋白質(zhì)),通過(guò)表面展示技術(shù)定位至芽孢桿菌的質(zhì)膜上,這一技術(shù)實(shí)現(xiàn)了
凝集素特異性識(shí)別并結(jié)合藍(lán)細(xì)菌,抑制藍(lán)細(xì)菌繁殖
凝集素特異性識(shí)別并結(jié)合藍(lán)細(xì)菌,抑制藍(lán)細(xì)菌繁殖
,應(yīng)用于修復(fù)水華現(xiàn)象。

【答案】λ噬菌體DNA兩端的cos位點(diǎn)可堿基互補(bǔ)配對(duì)相互連接;5′-CTCGAG-3′;DNA聚合;胸腺嘧啶脫氧核苷酸、胞嘧啶脫氧核苷酸;BamHⅠ或MobⅠ;①酶切后的λ噬菌體DNA的兩個(gè)末端相連接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾連接;凝集素特異性識(shí)別并結(jié)合藍(lán)細(xì)菌,抑制藍(lán)細(xì)菌繁殖
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/27 8:0:9組卷:2引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     

    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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