人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥。通過(guò)基因工程技術(shù)可以大量制備基因工程藥物t-PA。
(1)研究人員采用PCR技術(shù)可以獲得大量t-PA基因,PCR的原理是 DNA半保留復(fù)制(DNA雙鏈復(fù)制)DNA半保留復(fù)制(DNA雙鏈復(fù)制)。此外,大量獲得t-PA基因的方法還有 (化學(xué)方法)人工合成、從基因文庫(kù)中獲取(化學(xué)方法)人工合成、從基因文庫(kù)中獲取。(答出1種即可)
(2)高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增目的基因的前提條件之一,在制備DNA模板時(shí),可以用高溫處理的方法去除其中的蛋白質(zhì),原因是 蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活,而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性,但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活,而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性,但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性。
(3)研究表明,為心?;颊咦⑸浯罅縯-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血,其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高,若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低出血副作用。據(jù)此,先對(duì)天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。(注:如圖1表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒,新霉素為抗生素。)請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
①以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過(guò)程被稱為 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,而絲氨酸的密碼子為UCU,因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為 AGAAGA。
②如圖所示,需選用限制酶XmaI和 BglⅡBglⅡ切開(kāi)質(zhì)粒pCLY11,才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比,本操作采用的雙酶切方法的優(yōu)點(diǎn)是 防止質(zhì)粒載體(和目的基因)自身環(huán)化防止質(zhì)粒載體(和目的基因)自身環(huán)化。
③將連接好的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,含t-PA改良基因重組DNA分子的細(xì)胞應(yīng)具有的性狀是 CC。
A.新霉素抗性且呈藍(lán)色 B.新霉素敏感且呈藍(lán)色
C.新霉素抗性且呈白色 D.新霉素敏感且呈白色
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】DNA半保留復(fù)制(DNA雙鏈復(fù)制);(化學(xué)方法)人工合成、從基因文庫(kù)中獲??;蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活,而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性,但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性;蛋白質(zhì)工程;AGA;BglⅡ;防止質(zhì)粒載體(和目的基因)自身環(huán)化;C
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.7
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1.科學(xué)家為了提高光合作用過(guò)程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
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C.人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
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