為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。

注：GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍(lán)色
（1）將草甘膦抗性基因作為

目的基因

目的基因

，與Ti質(zhì)粒用相同的

限制性核酸內(nèi)切酶

限制性核酸內(nèi)切酶

和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。
（2）用

CaCl₂

CaCl₂

處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細(xì)胞，將其與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在添加

潮霉素

潮霉素

的培養(yǎng)基中，經(jīng)篩選1得到含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。
（3）取某品種水稻的幼胚，先進(jìn)行

消毒

消毒

處理，然后接種到培養(yǎng)基中，水稻幼胚細(xì)胞發(fā)生

脫分化

脫分化

形成愈傷組織。用含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌侵染該愈傷組織。
（4）利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5’---ATGGCT………AGGAAC---3’
3’---TACCGA………TCCTTG---5’
根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物

BD

BD

（填字母）進(jìn)行PCR。
A．引物：5’-TACCGA-3’
B．引物：5’-GTTCCT-3’
C．引物：5’-AUGGCU-3’
D．引物：5’-ATGGCT-3’
（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2，以確定目的基因是否

表達(dá)

表達(dá)

。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的

再分化

再分化

過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。
（6）為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻，還需要在個體水平進(jìn)行抗性測試。請你設(shè)計一個實驗方案，篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻。

選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻；用等量相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑；相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后；觀測水稻的生長情況

選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻；用等量相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑；相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后；觀測水稻的生長情況

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