芽孢桿菌生長迅速，營養(yǎng)要求簡單，且能形成抗逆性很強的芽孢。某實驗小組欲以黃瓜灰霉病菌作為指示菌，從采集到的土樣中分離芽孢桿菌，并從分離到的芽孢桿菌中篩選高效廣譜拮抗菌（指一種菌能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制另外一種菌的生存），其所需培養(yǎng)基和實驗步驟如下?；卮鹣铝袉栴}：
（一）培養(yǎng)基
PB培養(yǎng)基：用于病原細菌的培養(yǎng)和病原細菌拮抗菌的培養(yǎng)、篩選及保存。
PDA培養(yǎng)基：用于病原真菌的培養(yǎng)和病原真菌拮抗菌的篩選。
（二）實驗步驟
（1）芽孢桿菌的分離和純化
準確稱取10g土壤樣品，加入到盛有90 mL的無菌水中，振蕩靜止后再用 無菌移液器無菌移液器吸取10mL土壤懸液加到90 mL無菌水中，充分混勻，即得 102102倍稀釋液，然后以此類推逐步梯度稀釋至適當濃度，取合適稀釋度下的菌液，涂布接種于 PBPB固體培養(yǎng)基上。根據(jù)菌落的 大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度（答三個）等特征，挑取不同形態(tài)的單菌落，作為待測原始菌株。
（2）拮抗菌的初篩--五點對峙法
在PDA平板中心接種黃瓜灰霉病菌菌餅，四周等距離接種待篩選芽孢桿菌，25℃恒溫培養(yǎng)，每個篩選實驗重復(fù)3次，目的是 避免實驗的偶然性，使實驗結(jié)果更可靠避免實驗的偶然性，使實驗結(jié)果更可靠。根據(jù) 各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大小各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大小比較拮抗能力，從而保留拮抗效果優(yōu)良的菌株。
（3）探究培養(yǎng)時間對抗菌物質(zhì)的影響
實驗小組通過篩選找出了優(yōu)良的芽孢桿菌菌株ch-22，現(xiàn)欲探究培養(yǎng)時間對其產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)活性的影響，請簡要寫出實驗思路：取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾，適宜條件下，分別培養(yǎng)不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發(fā)酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果（培養(yǎng)時間可改變）取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾，適宜條件下，分別培養(yǎng)不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發(fā)酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果（培養(yǎng)時間可改變）。
【答案】無菌移液器；102；PB；大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度；避免實驗的偶然性，使實驗結(jié)果更可靠；各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大?。蝗∵m量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾，適宜條件下，分別培養(yǎng)不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發(fā)酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果（培養(yǎng)時間可改變）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：2難度：0.7
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1．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規(guī)律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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