魚腥草具有清熱解毒的功能。人工栽培的魚腥草易感染病菌，使其抗病能力降低，影響產(chǎn)量和質(zhì)量?？咕膶?xì)菌有很強(qiáng)的殺傷作用，研究人員為獲得轉(zhuǎn)抗菌肽基因魚腥草進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，流程如圖。
回答下列問題：
（1）步驟①選擇HindⅢ與SacⅠ兩種限制酶切割目的基因，這兩種酶作用的部位是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。切割質(zhì)粒的限制酶要與切割目的基因的限制酶 相同相同（填“相同”或“不相同”）。
（2）常用 PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原因是 目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動子、終止子等目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動子、終止子等。
（3）進(jìn)行步驟②時，將 氯化鈣氯化鈣處理過的農(nóng)桿菌與重組質(zhì)?；旌?，使重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，完成轉(zhuǎn)化。
（4）將步驟②獲得的農(nóng)桿菌在含潮霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，能繁殖出菌落的不僅是含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，還可能是 只含質(zhì)粒載體的農(nóng)桿菌只含質(zhì)粒載體的農(nóng)桿菌。
（5）若抗菌肽基因已經(jīng)整合到魚腥草的基因組中，但轉(zhuǎn)基因魚腥草的抗病能力沒有提高，可用 分子雜交分子雜交技術(shù)檢測抗菌肽基因是否正常表達(dá)：轉(zhuǎn)基因魚腥草抗病能力沒有提高的原因還可能是 表達(dá)得到的抗菌肽沒有活性表達(dá)得到的抗菌肽沒有活性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】磷酸二酯鍵；相同；PCR；目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動子、終止子等；氯化鈣；只含質(zhì)粒載體的農(nóng)桿菌；分子雜交；表達(dá)得到的抗菌肽沒有活性
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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