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科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中,含P基因的DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示,其中強(qiáng)啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請(qǐng)回答下列問題。
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(1)以RNA為模板,通過RT-PCR技術(shù)可獲取P基因。進(jìn)行RT-PCR時(shí)一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)而不是脫氧核苷酸,其原因是
dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料
dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料
,同時(shí)需加入的酶有了特異性擴(kuò)增P基因序列,需根據(jù)
P基因兩端的堿基序列
P基因兩端的堿基序列
設(shè)計(jì)特異性引物。
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是
BamHI
BamHI
SacI
SacI
這樣操作不僅使P基因在玉米植株中超量表達(dá),還可利用T-DNA的
可轉(zhuǎn)移
可轉(zhuǎn)移
特性,最終使P基因
整合到玉米細(xì)胞染色體上
整合到玉米細(xì)胞染色體上

(3)對(duì)轉(zhuǎn)基因再生玉米植株進(jìn)行鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn),有些植株雖有P基因,但幾乎沒有P蛋白,造成該現(xiàn)象的原因可能有
基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動(dòng)子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)
基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動(dòng)子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)
。
限制酶 識(shí)別序列
ClaⅠ 5′-ATCGAT-3′
BamHⅠ 5′-GGATCC-3′
HindⅢ 5′-AAGCTT-3′
EcoRⅠ 5′-GAATTC-3′
KpnⅠ 5′-GGTACC-3′
SacⅠ 5′-GAGCTC-3′

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料;P基因兩端的堿基序列;BamHI;SacI;可轉(zhuǎn)移;整合到玉米細(xì)胞染色體上;基因轉(zhuǎn)化過程中強(qiáng)啟動(dòng)子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:7引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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