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新冠疫苗有很多種,我國(guó)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)研發(fā)的腺病毒載體重組新冠疫苗是一種基因工程疫苗,具體構(gòu)建過程如下圖所示,請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。
(1)構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體,需要S蛋白基因、復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
、
終止子
終止子
等組件。
(2)圖中4種限制酶切割位點(diǎn)識(shí)別序列如圖1所示,構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體時(shí)需要使用限制酶
NcoI
NcoI
BamHI
BamHI
切割腺病毒基因和新冠病毒S蛋白基因。
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限制酶 NcoⅠ SphⅠ NheⅠ BamHⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) C↓CATGG GCATG↓C GCTAGC G↓GATCC
(3)針對(duì)新冠病毒目前常用“熒光RT—PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè),方法是取被檢測(cè)者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測(cè)過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,熒光信號(hào)不斷增強(qiáng),如圖2。
①理論上,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈
陽(yáng)性
陽(yáng)性
,但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過
閾值
閾值
時(shí)才確診。現(xiàn)有甲、乙兩個(gè)待檢樣本,檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移,請(qǐng)給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。
②平臺(tái)期出現(xiàn)的原因是
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
。
③雖然熒光RT一PCR是當(dāng)前被廣泛認(rèn)可的檢測(cè)手段之一,但是不斷有“假陰性”現(xiàn)象報(bào)道,通過上述過程分析“假陰性”的可能原因有
abc
abc
(填字母)。
a.通過咽拭子取樣不規(guī)范或取樣所獲樣本量不足
b.在樣本運(yùn)輸、檢測(cè)中出現(xiàn)了損壞和污染
c.病毒相應(yīng)關(guān)鍵序列發(fā)生了基因突變

【答案】啟動(dòng)子;終止子;NcoI;BamHI;陽(yáng)性;閾值;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加;abc
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:2難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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