新冠疫苗有多種，包括滅活疫苗、腺病毒載體疫苗、重組亞單位疫苗和核酸疫苗等。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過程，箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點（四種酶的識別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
| 限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
| 識別序列和切割位點 | C↓CATGG | CCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
（1）圖中①過程需要使用逆轉(zhuǎn)錄酶先得到cDNA，再使用
PCR
PCR
技術(shù)擴增得到S基因。完成以后，常采用 瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
鑒定擴增產(chǎn)物。（2）為使③過程順利進行，需先使用限制酶
NcoⅠ
NcoⅠ
和 NheⅠ
NheⅠ
切割質(zhì)粒B，選用兩種限制酶對新冠病毒的S基因進行切割的目的是 防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）
防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）
（答出一點即可）。（3）圖中表示篩選的過程是⑤，為達到利用標(biāo)記基因篩選的目的，普通的P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是
不能合成蔗糖酶，無法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存
不能合成蔗糖酶，無法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；瓊脂糖凝膠電泳；NcoⅠ；NheⅠ；防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）；不能合成蔗糖酶，無法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/3 8:0:9組卷：4引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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