黃瓜花葉病毒（CMV）是能侵染多種植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中，成功獲得抗CMV的番茄植株。
（1）獲得CMV的RNA后，需在逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。
（2）獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNAT-DNA片段中，然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，以實(shí)現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。
（3）將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間，只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA，你認(rèn)為他們做出以上判斷的理由是重組表達(dá)載體同時(shí)含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織重組表達(dá)載體同時(shí)含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織。愈傷組織經(jīng)再分化再分化長出小芽后還需要轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根。
（4）要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達(dá)出CMV外殼蛋白，需要進(jìn)行抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn)。
（5）研究人員用強(qiáng)致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄未轉(zhuǎn)基因的番茄，通過對照發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力。轉(zhuǎn)基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3：1，由此可以得出的結(jié)論是目的基因已經(jīng)整合到受體細(xì)胞的染色體上目的基因已經(jīng)整合到受體細(xì)胞的染色體上；獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子（答出兩點(diǎn)）。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；T-DNA；重組表達(dá)載體同時(shí)含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織；再分化；生根培養(yǎng)基；抗原-抗體雜交；未轉(zhuǎn)基因的番茄；目的基因已經(jīng)整合到受體細(xì)胞的染色體上；獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：3難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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