鎳是一種重金屬，由于在工業(yè)上被大量使用及廢料的大量排放而對(duì)環(huán)境產(chǎn)生了嚴(yán)重的污染。科研人員采用重組DNA技術(shù)構(gòu)建了兩種重組質(zhì)粒，其中重組質(zhì)粒pSUNI含有nixA基因，該基因編碼一種高特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，重組質(zhì)粒pGPMT3帶有編碼金屬硫蛋白基因（tmG），金屬硫蛋白（TM）可高容量地結(jié)合重金屬離子，又可在細(xì)胞內(nèi)消除重金屬離子對(duì)細(xì)胞本身的毒害作用?？蒲腥藛T再利用基因工程將兩種目的基因?qū)氲酱竽c桿菌，培育出能夠富集Ni2+的“超級(jí)細(xì)菌”——大腸桿菌JM109，用來(lái)凈化工業(yè)廢水，治理環(huán)境污染?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒pSUNI、pGPMT3所需要的兩種酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌JM109細(xì)胞之后，nixA基因表達(dá)產(chǎn)物分布在大腸桿菌的 細(xì)胞膜細(xì)胞膜。
（2）為檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入大腸桿菌，可采用PCR技術(shù)對(duì)待測(cè)大腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)，但需先提取其DNA。為充分溶解DNA，將獲得的沉淀物溶于 2mol/LNaCl2mol/LNaCl（要求寫(xiě)出液體名稱(chēng)及具體濃度）中，再用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳（填一種方法）對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行鑒定。
（3）為獲得大量的大腸桿菌JM109，科研人員將受體菌分別接種于3個(gè)盛有等量同種液體培養(yǎng)基的容器瓶中，并放置在搖床上培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速分別為210r/min,230r/min和250r/min。培養(yǎng)時(shí)間與大腸桿菌種群密度的關(guān)系如圖1所示。分析數(shù)據(jù)可以得出結(jié)論：在一定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)，搖床轉(zhuǎn)速越高，種群密度越大種群密度越大，其原因是 搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)基中O?越充足，與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積越大，大腸桿菌繁殖的速度越快搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)基中O?越充足，與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積越大，大腸桿菌繁殖的速度越快。
（4）科研人員為檢測(cè)大腸桿菌JM109富集Ni2+的效果，在適宜的條件下培養(yǎng)原JM109、JM109+pSUNI、JM109+pSUNI+pGPMT3，在含有一定濃度Ni2+的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，檢測(cè)大腸桿菌菌體的數(shù)量和菌體中Ni2+的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。JM109+pSUNI組的大腸桿菌數(shù)量最少的原因是 特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，且沒(méi)有金屬硫蛋白（TM）消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，且沒(méi)有金屬硫蛋白（TM）消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶；細(xì)胞膜；2mol/LNaCl；瓊脂糖凝膠電泳；種群密度越大；搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)基中O?越充足，與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積越大，大腸桿菌繁殖的速度越快；特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni2+轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，且沒(méi)有金屬硫蛋白（TM）消除Ni2+對(duì)自身細(xì)胞的毒害作用
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/4 8:0:8組卷：3引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6