人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。通過基因工程技術(shù)可以大量制備藥物t-PA。
（1）研究人員采用PCR技術(shù)可以獲得大量t-PA基因，PCR的原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制。擴(kuò)增時(shí)，需要先根據(jù) t-PA基因的核苷酸序列t-PA基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物。在制備高質(zhì)量t-PA基因模板時(shí)，可以用高溫處理的方法去除蛋白質(zhì)，原因是 蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活，而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性，但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活，而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性，但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性。
（2）研究表明，為心?；颊咦⑸湎拗泼缸R(shí)別序列和切割位點(diǎn)大量t-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高。若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。如圖表示相關(guān)的目的基因、限制酶及抗性基因。
①改良藥物t-PA的生產(chǎn)過程，
實(shí)質(zhì)是對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造的過程，它必須通過 改造或合成基因改造或合成基因來實(shí)現(xiàn)，原因主要是 改造后的基因可以遺傳給下一代，而被改造的蛋白質(zhì)無法遺傳改造后的基因可以遺傳給下一代，而被改造的蛋白質(zhì)無法遺傳。
②基因工程最核心的步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其目的是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用中，需選用限制酶 XmaⅠ和NheⅠXmaⅠ和NheⅠ 切開質(zhì)粒，才能與t-PA改良基因高效連接。
③在篩選過程中，應(yīng)該選擇不含 neorneor的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，以便在選擇培養(yǎng)基中篩選出導(dǎo)入基因表達(dá)載體的大腸桿菌。簡要寫出篩選的思路為 將大腸桿菌涂布到含有新霉素的選擇培養(yǎng)基上，從長出的每個(gè)單菌落中挑取部分大腸桿菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的是導(dǎo)入成功的大腸桿菌將大腸桿菌涂布到含有新霉素的選擇培養(yǎng)基上，從長出的每個(gè)單菌落中挑取部分大腸桿菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的是導(dǎo)入成功的大腸桿菌。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA半保留復(fù)制；t-PA基因的核苷酸序列；蛋白質(zhì)在高溫條件下會(huì)變性失活，而DNA雖然在高溫時(shí)會(huì)變性，但在低溫時(shí)又會(huì)復(fù)性；改造或合成基因；改造后的基因可以遺傳給下一代，而被改造的蛋白質(zhì)無法遺傳；使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用；XmaⅠ和NheⅠ；neor；將大腸桿菌涂布到含有新霉素的選擇培養(yǎng)基上，從長出的每個(gè)單菌落中挑取部分大腸桿菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的是導(dǎo)入成功的大腸桿菌
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：3引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7