研究人員利用農桿菌介導法和花粉管通道法培育出轉抗寒基因PgLCBF1的月季石榴，主要過程示意圖如圖。請回答下列問題。
（1）質粒pBI121的復制原點中A-T比例高，有利于 解旋解旋。過程①用限制酶XbaⅠ分別切割質粒和抗寒基因，原因是 形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質粒特定部位形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質粒特定部位。
（2）過程②篩選時，應將菌液用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，使用的培養(yǎng)基除水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子外，還應加入的物質有 瓊脂、新霉素瓊脂、新霉素。實驗中過程③擴大培養(yǎng)的主要目的是 轉基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質粒（或獲得更多的重組質粒）轉基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質粒（或獲得更多的重組質粒）。
（3）轉基因農桿菌借助萌發(fā)的花粉管運輸，將PgLCBF1導入 受精卵受精卵中，最終獲得轉基因種子，經播種、篩選出抗寒月季石榴新品種。與農桿菌直接轉化月季石榴葉肉細胞相比，花粉管通道轉化法具有的優(yōu)點有 操作簡單、直接，不需要經過植物組織培養(yǎng)，轉化成功后可直接獲得種子操作簡單、直接，不需要經過植物組織培養(yǎng)，轉化成功后可直接獲得種子。
（4）為探究上述農桿菌菌液侵染的合適介質和時期，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。
| 實驗步驟 | 簡要操作過程 |
| 采集花粉 | 摘取花粉成熟的月季石榴花，自然陰干，收集花粉 |
| 配制不同介質 | 配制植物組織培養(yǎng)液（MS）、質量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液 |
| 配制農桿菌侵染液 | 取5mL轉基因農桿菌菌液，分別與① 等量的上述不同介質（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液） 等量的上述不同介質（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液） 混勻 |
| ② 人工授粉 人工授粉 |
蘸取收集好的花粉，輕輕點涂在花柱的柱頭上 |
| 侵染轉化 | 分別在授粉時和授粉后24h,選擇柱頭未開裂的花，③ 用等量不同的農桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭 用等量不同的農桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭 并作標記，每個處理侵染10朵花。 |
| 結果統(tǒng)計分析 | 分組獲得月季石榴種子，催芽播種、培植植株，統(tǒng)計坐果率、種子出芽率和轉化陽性率。（坐果率=坐果數(shù)/侵染花數(shù)×100%；出芽率=出芽數(shù)/播種數(shù)×100%；轉化陽性率=轉化成功的株數(shù)/播種數(shù)×100%）。 |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】解旋；形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質粒特定部位；稀釋涂布平板；瓊脂、新霉素；轉基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質粒（或獲得更多的重組質粒）；受精卵；操作簡單、直接，不需要經過植物組織培養(yǎng)，轉化成功后可直接獲得種子；等量的上述不同介質（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液）；人工授粉；用等量不同的農桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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