多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中，PG合成顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá)，可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期?？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如圖。據(jù)圖回答下列問題：

（1）若已獲取PG的mRNA，可通過

逆轉(zhuǎn)錄法

逆轉(zhuǎn)錄法

獲取PG基因。已知BamHI的識(shí)別序列如圖2甲所示，請(qǐng)?jiān)趫D2乙相應(yīng)位置畫出目的基因兩側(cè)的黏性末端。

。
（2）用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，理由是

重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞

重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞

。之后，還需將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3g/ml的蔗糖溶液中，觀察細(xì)胞

是否發(fā)生質(zhì)壁分離

是否發(fā)生質(zhì)壁分離

現(xiàn)象來鑒別細(xì)胞壁是否再生。
（3）由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與

天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA

天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA

互補(bǔ)結(jié)合，因此可抑制PG基因的正常表達(dá)。若

番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng)

番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng)

，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。
（4）將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細(xì)胞培育成完整的植株，需要用

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)

再分化

再分化

形成完整植株，此過程除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加

植物激素

植物激素

。
（5）某地開展以轉(zhuǎn)基因番茄種植為核心的生態(tài)農(nóng)業(yè)建設(shè)，利用其秸稈發(fā)酵制酒，酒糟喂牛，牛糞和一些番茄的葉片等做沼氣池的原料，沼氣用于燃燒，沼渣肥田提高番茄產(chǎn)量，該生態(tài)系統(tǒng)主要利用的生態(tài)農(nóng)業(yè)原理有

物質(zhì)循環(huán)再生、能量多級(jí)利用

物質(zhì)循環(huán)再生、能量多級(jí)利用

。