如圖是利用工程菌（大腸桿菌）生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切點(diǎn)各一個(gè)，且三種酶切割形成的末端各不相同，而AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，TetR表示四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)回答以下相關(guān)問(wèn)題：
（1）在目的基因的篩選與獲取過(guò)程中，如圖過(guò)程③的目的是 將平末端改造成黏性末端將平末端改造成黏性末端。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行切割，形成的DNA片段種類最多有 99種。
（2）基因表達(dá)載體是載體的一種，除目的基因、啟動(dòng)子外，它還必須有 標(biāo)記基因、終止子和復(fù)制原點(diǎn)標(biāo)記基因、終止子和復(fù)制原點(diǎn)（答2點(diǎn)）等。啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNARNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
（3）如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒，完成過(guò)程④、⑤后（受體大腸桿菌不含AmpR、TetR），⑤過(guò)程常用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌。將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上，形成菌落后用無(wú)菌牙簽挑取甲培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落，分別接種到乙和丙兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上，一段時(shí)間后，菌落的生長(zhǎng)狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選 含四環(huán)素抗性基因含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌；含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是 在丙中能存活，在乙中不能存活在丙中能存活，在乙中不能存活。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】將平末端改造成黏性末端；9；標(biāo)記基因、終止子和復(fù)制原點(diǎn)；RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；Ca2+；含四環(huán)素抗性基因；在丙中能存活，在乙中不能存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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