當(dāng)褐飛虱危害水稻時(shí)，某野生水稻中的抗褐”飛虱基因Bph14可感知這一信號(hào)并調(diào)動(dòng)其他基因的抗蟲(chóng)機(jī)制，即抑制害蟲(chóng)的取食和消化，使害蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育受阻，從而使野生水稻免受危害。為使種植水稻穩(wěn)產(chǎn)和增產(chǎn)，科研人員將抗褐飛虱基因Bph14與大腸桿菌的質(zhì)粒重組后導(dǎo)入普通水稻細(xì)胞，培育出轉(zhuǎn)基因抗褐飛虱水稻?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）采用PCR技術(shù)在體外獲得大量的基因Bph14時(shí)，擴(kuò)增目的基因的前提是 有一段已知目的基因（基因Bph14）的核苷酸序列有一段已知目的基因（基因Bph14）的核苷酸序列，以便設(shè)計(jì)合成 22種引物。引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用兩種不同限制酶分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，目的是 防止質(zhì)粒和目的基因（基因Bph14）自身環(huán)化；防止目的基因（基因Bph14）和質(zhì)粒反向連接[保證目的基因（基因Bph14）以正確的方向與Ti質(zhì)粒進(jìn)行連接]防止質(zhì)粒和目的基因（基因Bph14）自身環(huán)化；防止目的基因（基因Bph14）和質(zhì)粒反向連接[保證目的基因（基因Bph14）以正確的方向與Ti質(zhì)粒進(jìn)行連接]（答一點(diǎn)）?；駼ph14和質(zhì)粒中抗生素抗性基因應(yīng)位于Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA片段中，原因是 Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠轉(zhuǎn)移并整合到水稻細(xì)胞的染色體DNA上Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠轉(zhuǎn)移并整合到水稻細(xì)胞的染色體DNA上。
（3）將構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入水稻組織細(xì)胞后，欲檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻是否含有基因Bph14，可采用DNA分子雜交技術(shù)，該技術(shù)應(yīng)以 用放射性同位素標(biāo)記的含有基因Bph14（目的基因）的DNA片段用放射性同位素標(biāo)記的含有基因Bph14（目的基因）的DNA片段作為探針；若從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè)，則需要做 抗蟲(chóng)接種（將褐飛虱接種到轉(zhuǎn)基因水稻植株的葉片上）抗蟲(chóng)接種（將褐飛虱接種到轉(zhuǎn)基因水稻植株的葉片上）實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】有一段已知目的基因（基因Bph14）的核苷酸序列；2；使DNA聚合酶能夠從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸；防止質(zhì)粒和目的基因（基因Bph14）自身環(huán)化；防止目的基因（基因Bph14）和質(zhì)粒反向連接[保證目的基因（基因Bph14）以正確的方向與Ti質(zhì)粒進(jìn)行連接]；T-DNA；Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠轉(zhuǎn)移并整合到水稻細(xì)胞的染色體DNA上；用放射性同位素標(biāo)記的含有基因Bph14（目的基因）的DNA片段；抗蟲(chóng)接種（將褐飛虱接種到轉(zhuǎn)基因水稻植株的葉片上）
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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