請根據(jù)“血紅蛋白的提取和分離”實驗,回答下列問題:
(1)血紅蛋白因含有 血紅素血紅素(該物質(zhì)中含F(xiàn)e2+)而呈紅色,這有利于對提取過程進行監(jiān)測。
(2)在進行樣品處理時首先要使用 生理鹽水生理鹽水對紅細胞進行洗滌。在該過程中,若 離心速度過高和時間過長離心速度過高和時間過長會使白細胞一同沉淀,達不到分離的效果。
(3)將洗滌好的紅細胞倒入燒杯中,加入 蒸餾水和甲苯蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白,再通過離心的方法將血紅蛋白從混合液中分離出來。
(4)將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析,透析的原理是 透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi)透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi)。
(5)通過凝膠色譜法將樣品進一步純化。裝填色譜柱時不能有氣泡存在,因為 氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序降低分離效果。
(6)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。加入 SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于 分子的大小分子的大小。
(7)本實驗用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex G-75),其中“75”表示 凝膠得水值凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸收水分7.5g。
【考點】蛋白質(zhì)的結構和功能的綜合.
【答案】血紅素;生理鹽水;離心速度過高和時間過長;蒸餾水和甲苯;透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi);氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序;分子的大??;凝膠得水值
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:4引用:2難度:0.6
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