纖維素酶廣泛應(yīng)用在紡織、能源、食品等領(lǐng)域,提高纖維素酶的熱穩(wěn)定性可提高反應(yīng)溫度,加快降解速度研究耐熱纖維素酶在工業(yè)生產(chǎn)上具有重要意義。嗜熱梭菌是一種高溫厭氧細(xì)菌,其產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶(bglB)是一種耐熱纖維素酶,科研人員將bglB基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,構(gòu)建了耐高溫的纖維素酶大腸桿菌。回答下列問題:
(1)利用PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí),每次循環(huán)一般分為變性、復(fù)性復(fù)性和 延伸延伸三步,其中變性的目的是 將雙鏈DNA解聚為單鏈將雙鏈DNA解聚為單鏈。
(2)如圖1為質(zhì)粒的限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒,bglB基因兩端需要分別引入 NdeⅠNdeⅠ和 BamHⅠBamHⅠ限制酶的識(shí)別序列。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前,一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞,目的是 使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)。
(3)將篩選到的轉(zhuǎn)bglB基因大腸桿菌進(jìn)行耐高溫實(shí)驗(yàn),結(jié)果如圖2所示。在工業(yè)生產(chǎn)上,為提高纖維素降解速率,最好將溫度控制在 6060℃。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】復(fù)性;延伸;將雙鏈DNA解聚為單鏈;NdeⅠ;BamHⅠ;使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài);60
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/22 8:0:10組卷:1引用:2難度:0.5
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