IKK激酶參與動物體內免疫細胞的分化。臨床上發(fā)現某重癥聯合免疫缺陷(SCID)患兒IKK基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃,導致IKK上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機制,研究人員利用純合野生鼠應用大引物PCR定點誘變技術培育出SCID模型小鼠(純合),主要過程如圖甲、乙、分析回答下列問題:
?
(1)在圖甲獲取突變基因過程中,需要以下3種引物:
引物A | 5′-CCCAACCGGAAAGTGTCA-3′ (下劃線字母為突變堿基) |
引物B | 5′-TAAGCTTCGAACATCCTA-3′ (下劃線部分為限制酶HindⅢ識別序列) |
引物C | 5′-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3′(下劃線部分為限制酶SacⅠ識別序列) |
引物A和引物B
引物A和引物B
,PCR2中使用的引物有 引物C
引物C
和圖中大引物的 ②
②
(填“①”或“②”)鏈。(2)將突變基因導入小鼠受精卵最有效的方法是
顯微注射法
顯微注射法
。(3)研究人員經鑒定、篩選獲得一只轉基因雜合鼠F0,并確認突變基因已經穩(wěn)定同源替代IKK基因。利用雜交鼠F,通過雜交獲得SCID模型鼠,請將實驗步驟補充完整;
①雜交親本:
F0×野生鼠
F0×野生鼠
,雜交得F1;②
F1雌雄鼠隨機交配
F1雌雄鼠隨機交配
得F2;③提取F2每只小鼠的基因組DNA,采用分子生物學方法,利用IKK基因探針和突變基因探針進行篩選,則
IKK基因探針檢測未出現雜交帶,突變基因探針檢測出現雜交帶
IKK基因探針檢測未出現雜交帶,突變基因探針檢測出現雜交帶
的為模型鼠。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】引物A和引物B;引物C;②;顯微注射法;F0×野生鼠;F1雌雄鼠隨機交配;IKK基因探針檢測未出現雜交帶,突變基因探針檢測出現雜交帶
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/19 9:0:1組卷:13引用:2難度:0.5
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發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7難度:0.6 -
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