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長期高血糖可引發(fā)血管細胞衰老??蒲腥藛T為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細胞衰老中的治療效果,以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因導入血管細胞,實現(xiàn)S蛋白在血管細胞中的 大量表達。腺病毒由腺病毒DNA和腺病毒外殼蛋白構成,其DNA復制需要其自身所攜帶的E1、E2、E3基因共同完成。科研人員通過基因編輯技術敲除了腺病毒DNA中的E3基因,然后將S基因與腺病毒 DNA進行重組,如圖1所示。在體外,將E3基因導入人體的干細胞,稱之為A細胞(E3基因可在A細胞內(nèi)正常表達)。然后把重組腺病毒DNA導入A細胞中。

(1)要鑒定重組腺病毒DNA是否導入A細胞,可采用的方法是用
標記的S基因的單鏈DNA
標記的S基因的單鏈DNA
作為探針進行
DNA分子雜交
DNA分子雜交
。當腺病毒DNA在導入A細胞后,通過DNA分子復制和
表達腺病毒外殼蛋白
表達腺病毒外殼蛋白
,從而最終組裝出大量完整的重組腺病毒。
(2)用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細胞,使S蛋白在血管細胞中大量表達。對正常人、糖尿病患者及二者轉入S基因后血管細胞中能促進細胞衰老的Ⅰ蛋白進行檢測,結果如圖2所示(條帶越寬代表Ⅰ蛋白表達量越高)??捎?
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
方法檢測 I 蛋白的表達量:實驗結果顯示
糖尿病患者(或2組)
糖尿病患者(或2組)
血管細胞中 I 蛋白表達量最高,推測 S 蛋白對高血糖引發(fā)的血管細胞衰老的作用及機制是
S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老
S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老
。
(3)結合上述信息,用該方法構建的重組腺病毒進行疾病治療,從生物安全性角度分析其優(yōu)點是
重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞
重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞
。(寫出1點)

【答案】標記的S基因的單鏈DNA;DNA分子雜交;表達腺病毒外殼蛋白;抗原-抗體雜交;糖尿病患者(或2組);S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老;重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:2難度:0.6
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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