長期高血糖可引發(fā)血管細胞衰老??蒲腥藛T為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細胞衰老中的治療效果,以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因導入血管細胞,實現(xiàn)S蛋白在血管細胞中的 大量表達。腺病毒由腺病毒DNA和腺病毒外殼蛋白構成,其DNA復制需要其自身所攜帶的E1、E2、E3基因共同完成。科研人員通過基因編輯技術敲除了腺病毒DNA中的E3基因,然后將S基因與腺病毒 DNA進行重組,如圖1所示。在體外,將E3基因導入人體的干細胞,稱之為A細胞(E3基因可在A細胞內(nèi)正常表達)。然后把重組腺病毒DNA導入A細胞中。
(1)要鑒定重組腺病毒DNA是否導入A細胞,可采用的方法是用 標記的S基因的單鏈DNA標記的S基因的單鏈DNA作為探針進行 DNA分子雜交DNA分子雜交。當腺病毒DNA在導入A細胞后,通過DNA分子復制和 表達腺病毒外殼蛋白表達腺病毒外殼蛋白,從而最終組裝出大量完整的重組腺病毒。
(2)用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細胞,使S蛋白在血管細胞中大量表達。對正常人、糖尿病患者及二者轉入S基因后血管細胞中能促進細胞衰老的Ⅰ蛋白進行檢測,結果如圖2所示(條帶越寬代表Ⅰ蛋白表達量越高)??捎?抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢測 I 蛋白的表達量:實驗結果顯示 糖尿病患者(或2組)糖尿病患者(或2組)血管細胞中 I 蛋白表達量最高,推測 S 蛋白對高血糖引發(fā)的血管細胞衰老的作用及機制是 S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老。
(3)結合上述信息,用該方法構建的重組腺病毒進行疾病治療,從生物安全性角度分析其優(yōu)點是 重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞。(寫出1點)
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】標記的S基因的單鏈DNA;DNA分子雜交;表達腺病毒外殼蛋白;抗原-抗體雜交;糖尿病患者(或2組);S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老;重組腺病毒進入普通宿主細胞后,其DNA不能復制,從而不能產(chǎn)生子代來影響宿主細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:2難度:0.6
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