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2023-2024學(xué)年江蘇省鎮(zhèn)江市句容三中、南通市海安實(shí)驗(yàn)中學(xué)聯(lián)考高三（上）月考生物試卷（10月份）>
試題詳情
土壤鹽漬化影響水稻生長發(fā)育，將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中，培育耐鹽堿水稻新品種，其操作流程及可能用到的限制酶如圖，其中bar為抗除草劑基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ampr為氨芐青霉素抗性基因，①～⑦表示操作過程。
| 限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | SmaⅠ | Sau3AⅠ |
| 識別位點(diǎn)及切割位點(diǎn) | -G↓GATCC- | -T↓GATCA- | -CCC↓GGG- | -↓GATC- |
5'
5'
（“5'”或“3'”）端，過程①PCR擴(kuò)增OsMYB56基因時加入的酶催化 磷酸二酯（鍵）
磷酸二酯（鍵）
鍵的形成，還需要添加引物，應(yīng)選用引物組合 ①④
①④
。①5'-CTTGGATGAT-3'
②5'-TAAGTTGTCT-3'
③5'-TAGTAGGTTC-3'
④5'-TCTGTTGAAT-3
⑤5'-ATTCAACAGA-3'
⑥5'-ATCATCCAAG-3'
（2）根據(jù)基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)組成分析，Ti質(zhì)粒中的CaMV35S是
啟動子
啟動子
，其功能是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）
RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）
?；虮磉_(dá)載體中，OsMYB56基因和bar基因編碼鏈的方向 相反
相反
（填“相同”或“相反”）。（3）過程③應(yīng)選用限制酶
BclⅠ和SmaⅠ
BclⅠ和SmaⅠ
切割質(zhì)粒，利用所選限制酶進(jìn)行操作的優(yōu)勢是 防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
，切割后需要用 T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
進(jìn)行連接才能獲得重組質(zhì)粒。（4）為了篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，④過程應(yīng)在添加
四環(huán)素
四環(huán)素
的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)后獲得的菌落不能判定是否含有重組質(zhì)粒，原因是 含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細(xì)胞也能正常生長
含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細(xì)胞也能正常生長
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】5'；磷酸二酯（鍵）；①④；啟動子；RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）；相反；BclⅠ和SmaⅠ；防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接；T4DNA連接酶；四環(huán)素；含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細(xì)胞也能正常生長
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/12 8:0:8組卷：15引用：5難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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