為了改善黃瓜的品質(zhì),科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細(xì)胞,得到了轉(zhuǎn)基因黃瓜。
(1)甜蛋白基因所在DNA與Ti質(zhì)粒通常具有相同的限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列以便被剪切后在DNA連接酶作用下形成重組質(zhì)粒,導(dǎo)入到用氯化鈣氯化鈣處理的農(nóng)桿菌中。
(2)若選用原生質(zhì)體作為受體細(xì)胞,獲取原生質(zhì)體時(shí),將消毒消毒的葉片放入經(jīng)過濾過濾滅菌后的酶液,振蕩酶解3小時(shí),酶解后過濾出大組織塊,濾液中是酶和原生質(zhì)體混合物,將濾液通過離心離心方法分離出原生質(zhì)體。然后測(cè)定該原生質(zhì)體的活性,可采用的方法有染色法,滲透吸水或失水染色法,滲透吸水或失水(答出2點(diǎn)即可)。
(3)若選用黃瓜葉片作為受體細(xì)胞,篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌去侵染受傷的受傷的(填“受傷的”或“完好的”)黃瓜葉片。
(4)盡量選擇性狀優(yōu)良,細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型基因型黃瓜進(jìn)行克隆。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列;氯化鈣;消毒;過濾;離心;染色法,滲透吸水或失水;受傷的;基因型
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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