新冠病毒是一種單鏈RNA病毒，其表面的S蛋白是主要的病毒抗原。我國(guó)陳薇院士及其團(tuán)隊(duì)研發(fā)以缺失E₁基因復(fù)制缺陷腺病毒為載體的新冠疫苗已獲批上市，該病毒的E₂、E₃是抗原蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵基因，如圖為該團(tuán)隊(duì)研制新冠疫苗的流程示意圖。

請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）腺病毒載體重組疫苗的研發(fā)過(guò)程使用了基因工程技術(shù)，其中最核心的步驟是

③

③

（填序號(hào)）。圖中①過(guò)程需要用

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

酶得到cDNA，②過(guò)程為選擇性擴(kuò)增S蛋白基因，該過(guò)程除需要模板、原料外，還需要2種引物和

耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）

耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）

。
（2）據(jù)圖可選用

EcoRⅠ、BamH III

EcoRⅠ、BamH III

兩種限制酶切割質(zhì)粒I和S蛋白基因。為了獲得并擴(kuò)增重組質(zhì)粒I，將上述切開(kāi)的質(zhì)粒與目的基因混合后加入DNA連接酶連接，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞，若不考慮基因突變，此時(shí)受體細(xì)胞的類型為

C

C

。
A．抗氨芐青霉素、抗卡那霉素
B．抗氨芐青霉素、不抗卡那霉素
C．不抗氨芐青霉素、抗卡那霉素
D．不抗氨芐青霉素、不抗卡那霉素
（3）若研究團(tuán)隊(duì)從國(guó)家微生物科學(xué)數(shù)據(jù)中心獲得了新冠病毒S蛋白的引物序列，已知其中一段引物的序列為GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT，能否根據(jù)該引物序列設(shè)計(jì)出另一段引物的序列？原因是

不能。引物是根據(jù)已知目的基因（S蛋白基因）的核苷酸序列設(shè)計(jì)的。

不能。引物是根據(jù)已知目的基因（S蛋白基因）的核苷酸序列設(shè)計(jì)的。

。
（4）若將該過(guò)程腺病毒基因表達(dá)載體做成“DNA加強(qiáng)疫苗”注射入人體，與重組腺病毒減毒疫苗相比，前者具有的優(yōu)點(diǎn)是

質(zhì)粒DNA非常穩(wěn)定，易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸；制備簡(jiǎn)單，容易大量生產(chǎn)，成本低；在宿主體內(nèi)可較長(zhǎng)時(shí)間存在，持續(xù)表達(dá)抗原蛋白

質(zhì)粒DNA非常穩(wěn)定，易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸；制備簡(jiǎn)單，容易大量生產(chǎn)，成本低；在宿主體內(nèi)可較長(zhǎng)時(shí)間存在，持續(xù)表達(dá)抗原蛋白

（答出兩點(diǎn)即可）。